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各位前辈,小虫重组质粒双酶切琼脂糖电泳,没有条带,请求帮助.....已有1人参与
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最左边为Marker,左二、三为EcoR I,BamH I 双酶切,左四为Hind III,左五为EcoR I,左六为 NdeI单酶切(目的片段有两个NdeI酶切位点),最右边两个为从大肠杆菌工程菌中提取的重组质粒。质粒为pET28a,目的片段为1500左右。双酶切体系为10ul,质粒7ul 酶各0.5 buffer K 1ul。前辈们给看看 这张图怎么个情况啊 (1 )重组质粒7000左右,怎么跑到marker 10000还要大(2 )目的片段是通过EcoR I,BamH I 双酶切链接上去的,现在双酶切怎么没有条带(3)Hind III切完 怎么会是两条带 谢谢各位指导了 |
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