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关于pcr的问题,没条带??????
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ycycyc
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关于pcr的问题,没条带??????
问一下,有没有实验高手,扩增长片段pcr的时候,之前用试剂盒提取的DNA
有产物,换做酚抽提法提取的dna做模版以后就没有产物了。是怎么回事呢?然后又用试剂盒提取的dna做模版,同样的条件,又没有产物了。
所以,弄不明白具体是什么问题。两次试剂盒提取的DNA,用琼脂糖凝胶电泳检测,发现第一次条带较暗,第二次很亮。
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1楼
2013-05-30 14:53:21
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2013-05-30 18:51:42
是不是第二次虽然提的浓度较高,但是纯度不够?酚之类的没有除去干净影响PCR效果、
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ycycyc
2楼
2013-05-30 15:45:20
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2楼
:
Originally posted by
德国工兵铲
at 2013-05-30 15:45:20
是不是第二次虽然提的浓度较高,但是纯度不够?酚之类的没有除去干净影响PCR效果、
dna用nano测了浓度和od值,貌似还可以。现在也不确定,有可能酶出了问题。
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4楼
2013-05-30 21:56:30
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2013-06-02 15:47:45
如果不是实际问题,八成是浓度问题,一般10ul体系推荐DNA量为20ng,楼主换算一下看看,如果大于100效果就不太好!
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5楼
2013-06-01 09:02:05
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5楼
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Originally posted by
世外清风
at 2013-06-01 09:02:05
如果不是实际问题,八成是浓度问题,一般10ul体系推荐DNA量为20ng,楼主换算一下看看,如果大于100效果就不太好!
谢谢哦,最近一直没进展呢,你的建议很好,我试一下。请问你是搞遗传分子这块的吗?
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6楼
2013-06-01 17:32:09
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我用过氛,你的那个估计是过期了啊,你是不是吸到上层的油了啊
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7楼
2013-06-01 20:51:07
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6楼
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Originally posted by
ycycyc
at 2013-06-01 17:32:09
谢谢哦,最近一直没进展呢,你的建议很好,我试一下。请问你是搞遗传分子这块的吗?...
是的
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8楼
2013-06-01 21:08:14
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7楼
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Originally posted by
taojun
at 2013-06-01 20:51:07
我用过氛,你的那个估计是过期了啊,你是不是吸到上层的油了啊
上层是油吗???
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9楼
2013-06-02 08:37:14
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2013-06-02 09:51:11
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