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ycycyc

新虫 (小有名气)

[求助] 关于pcr的问题,没条带??????

问一下,有没有实验高手,扩增长片段pcr的时候,之前用试剂盒提取的DNA
有产物,换做酚抽提法提取的dna做模版以后就没有产物了。是怎么回事呢?然后又用试剂盒提取的dna做模版,同样的条件,又没有产物了。
所以,弄不明白具体是什么问题。两次试剂盒提取的DNA,用琼脂糖凝胶电泳检测,发现第一次条带较暗,第二次很亮。
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ycycyc

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 世外清风 at 2013-06-01 09:02:05
如果不是实际问题,八成是浓度问题,一般10ul体系推荐DNA量为20ng,楼主换算一下看看,如果大于100效果就不太好!

谢谢哦,最近一直没进展呢,你的建议很好,我试一下。请问你是搞遗传分子这块的吗?
6楼2013-06-01 17:32:09
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德国工兵铲

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
ycycyc(myprayer代发): 金币+1, 感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-05-30 18:51:42
是不是第二次虽然提的浓度较高,但是纯度不够?酚之类的没有除去干净影响PCR效果、

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2013-05-30 15:45:20
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匿名

用户注销 (初入文坛)

本帖仅楼主可见
3楼2013-05-30 19:30:21
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ycycyc

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 德国工兵铲 at 2013-05-30 15:45:20
是不是第二次虽然提的浓度较高,但是纯度不够?酚之类的没有除去干净影响PCR效果、

dna用nano测了浓度和od值,貌似还可以。现在也不确定,有可能酶出了问题。
4楼2013-05-30 21:56:30
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