| 查看: 2005 | 回复: 15 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
求助--双酶切连接构质粒
|
||
|
各位大虾，SOS ::>_<:: 要构建一个质粒，大片段3200，小片段800。大片段是从4300的质粒上用SpeI和BglII双酶切切下来的，电泳检测片段大小没有问题，胶回收。小片段是从另一个质粒上PCR扩出来的，引物导入的酶切位点，一边一个，分别是SpeI和BglII，方向不会错，将PCR产物双酶切回收。然后连接，用的T4，连不上。后来将小片段先连到T载上，然后双酶切，电泳检测，切下来了，胶回收后用T4连接，还是连不上，然后放弃T4用T载试剂盒的solutionI连接，还是连不上。。。。。。感受态没问题。操作也没问题。做了有一个月了。。大家有没有碰到类似的情况呀？给点主意吧。。谢谢啦~新人木有钱- - [ Last edited by 1949stone on 2013-6-9 at 14:20 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有263人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 质粒酶切问题。急急急！
已经有7人回复
- 双酶切怎么操作才能完全彻底呢！
已经有27人回复
- 求助：EcoRI 和 XhoI双酶切
已经有25人回复
- pet28a 空质粒双酶切图像问题
已经有15人回复
- 双酶切的目的基因与质粒连接不上怎么办
已经有25人回复
- 质粒上的两个酶切位点紧挨着，双酶切能否切开
已经有6人回复
- 求助：质粒酶切问题，质粒被切飞了啊！！
已经有24人回复
- Takara的BamHI和XhoI双酶切求助
已经有6人回复
- 双酶切后如何才能让载体自连？
已经有6人回复
- 连接效率低，重组质粒无法酶切
已经有5人回复
- 求去掉环状质粒中酶切位点和切后的质粒连接问题？
已经有7人回复
- 双酶切问题，跪求指导啊
已经有5人回复
- 新人，请大侠赐教：构建重组质粒选择双酶切还是单酶切？
已经有13人回复
- 急求酶切，回收及连接详细操作步骤
已经有10人回复
- 纠结的分子实验，双酶切连不上，求助
已经有14人回复
- 双酶切体系构建 新手！
已经有3人回复
- 酶切产物能直接做连接反应吗
已经有5人回复
- 双酶切之后，线状质粒的连接问题
已经有13人回复
- 空质粒双酶切后大小不对，纠结！
已经有11人回复
- 我构建质粒后酶切验证的问题
已经有13人回复
- 双酶切，连接，转化问题
已经有30人回复
- pcr产物测序和克隆之后重组质粒测序结果一样吗？
已经有12人回复
- 酶切质粒时，怎样鉴定质粒是否被切开了啊？
已经有6人回复
- 【求助/交流】质粒双酶切，看图！
已经有6人回复
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
4楼2013-05-14 08:31:07
wangxin320
银虫 (小有名气)
- 应助: 17 (小学生)
- 金币: 1015.5
- 红花: 4
- 帖子: 67
- 在线: 46.4小时
- 虫号: 2438073
- 注册: 2013-04-26
- 专业: 生物化学
2楼2013-05-13 17:57:26
desheng101
木虫 (正式写手)
- 应助: 16 (小学生)
- 金币: 1926.8
- 散金: 30
- 红花: 3
- 帖子: 394
- 在线: 73.7小时
- 虫号: 1110789
- 注册: 2010-09-29
- 性别: GG
- 专业: 细胞周期与调控
3楼2013-05-13 19:11:58
5楼2013-05-14 16:37:01
