应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 酶切产物能直接做连接反应吗
61/1返回列表
查看: 4700  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

hylee103

金虫 (正式写手)

[求助] 酶切产物能直接做连接反应吗

酶切产物，不做胶回收，直接做连接反应，是否可行？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-03-21 08:25:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xy656691

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励应助！ 2013-03-21 11:19:55
hylee103: 金币+1, ★有帮助 2013-03-21 14:15:45
hylee103: 金币+1, ★有帮助 2013-07-02 21:57:27
不可行，假阳性太高了。你切开的质粒会重新连在一起的
赞一下 回复此楼
2楼2013-03-21 08:43:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cucu奶茶

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
hylee103: 金币+1, ★有帮助 2013-03-21 14:15:52
同意二楼的。你得到的转化子不好鉴定是目的片段还是非目的片段。还是得用回收产物做鉴定。
赞一下 回复此楼
3楼2013-03-21 09:12:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
hylee103: 金币+1, ★有帮助 2013-03-21 14:17:05
hylee103: 金币+1, ★有帮助 2013-07-02 21:57:55
看你怎么切的，柱子可以洗掉和primer大小相仿的DNA（大概60-70bp），来源于pcr得话模板少加点，或者加DpnI一起切都行。
如果一部分来自pcr一部分来自质粒得话可以做去磷酸化，搞清楚原理自己决定好了
赞一下 回复此楼
4楼2013-03-21 12:10:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
hylee103: 金币+1, ★有帮助 2013-03-22 14:42:37
如果是从质粒上切下来的不行，片段会连回到原来的载体里。如果是PCR产物是可以的。连接前要把限制性内切酶失活。对于不能加热失活的酶，不要用直接连。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2013-03-22 02:51:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhlf1989513

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
hylee103: 金币+1 2013-03-22 14:42:47
楼主你不能先纯化一下再连接么？
赞一下 回复此楼
keepon
6楼2013-03-22 09:04:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 hylee103 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭