| 查看: 2583 | 回复: 28 | |||
[交流]
请教一个PCR产物直接酶切的问题
|
|||
|
本人最近做PCR产物直接酶切来验证某个基因SNP的差异，野生型中含有可以酶切的一个位点，突变型中不含有酶切位点，PCR反应用全式金的Eco Taq Mix扩增的，片段大小为859bp，见附图中的1,2，3，9,10泳道，限制性内切酶用的不常用的Hpy99I(NEB),PCR产物没有过柱回收，连续做了好几次，用野生型的PCR产物酶切后均没有任何条带，今天酶切条件是25uL体系，2U酶，加了BSA,以第10泳道的PCR产物5uL作为模板酶切（昨天分别做了10uL和15uL的模板浓度，均无酶切条带，所以推测不是模板浓度的问题），酶切结果在第十一泳道，什么条带都没有。 另外，由于该PCR产物中有单一的HindIII酶切位点，因此选择HindIII作为阳性对照，做了平行的酶切反应，酶切结果见泳道4-8. 请问导致这种现象的原因是什么，谢谢。   PCR产物酶切.jpg [ Last edited by barrey on 2012-9-3 at 07:38 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
求调剂
已经有3人回复
-
285求调剂
已经有6人回复
-
材料求调剂
已经有3人回复
-
288求调剂
已经有6人回复
-
复试调剂
已经有12人回复
-
计算机11408，286分求调剂
已经有3人回复
-
材料专硕322分
已经有8人回复
-
一志愿上海海洋大学083200食品学硕，求调剂，接受其他专业083200
已经有5人回复
-
081200-11408-276学硕求调剂
已经有5人回复
-
材料调剂
已经有10人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 双酶切问题
已经有15人回复
- 请教一个关于测序结果的问题
已经有19人回复
- PCR产物经酶切电泳后所得的基因型与测序结果不一致，是何原因？该如何处理？
已经有10人回复
- PCR产物凝胶回收、酶切等问题请教
已经有7人回复
- 载体连接pcr片段一直连不上
已经有17人回复
- PCR ， 双酶切，连接问题
已经有17人回复
- 做一个克隆所需的最短时间？比比谁更高效快速！
已经有39人回复
- PCR产物酶切检测不到东西是为什么
已经有11人回复
- 【求助/交流】质粒DNA可以不通过酶切直接跑电泳检测吗？
已经有24人回复
- 【求助/交流】PCR产物测序总是不对
已经有13人回复
- 【求助/交流】PCR引物设计出来了，但酶切之后电泳没条带啊
已经有18人回复
- 【求助/交流】pcr,酶切，连接，哪步可以省？
已经有13人回复
- 克隆基因全长引物设计问题
已经有32人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
南方科技大学新材料重大科技设施研究院 科研助理招聘启事
+5/735
-
欢迎调剂到赣南师范大学智能制造与未来能源学院
+2/64
-
青岛农业大学海洋学院招调剂硕士研究生
+1/51
-
上海交大化院邓楠楠课题组招收26年秋季入学申请考核博士
+1/39
-
西南民族大学广招硕士调剂生！快到碗里来！
+1/39
-
2026-大连大学～六盘水师范学院联合培养硕士研究生，招收化学、环境等相关专业
+1/38
-
生物与医药专业硕士调剂（河北大学 化学与材料科学学院）
+2/28
-
招收2026级公共卫生与预防医学专业（学硕）调剂生1名
+1/15
-
★上海★上海工程技术大学·环境与资源创新中心（ICER）接收化工材料环境等学科调剂生
+1/9
-
浙江师范大学化学与材料科学院袁老师课题组接收有机化学方向硕士调剂生 （2026）
+1/8
-
中国农业大学资源与环境学院 - 招聘杰出人才（教授-专技四级）、青年研究员（副教授-�
+1/8
-
重庆工商大学 教育部研究中心招收化工/环境/材料/石油/机械方向2026年调剂研究生
+1/7
-
湖北汽车工业学院汽车材料学院2026年研究生调剂
+1/5
-
【#上海调剂急录#】能接受985联合培养的速来！带你发一区文章！
+1/5
-
丽水学院材料与能源工程学院 材料与化工、资源与环境专业2026年硕士研究生接受调剂
+1/5
-
航空工程363分求调剂
+1/4
-
欢迎广大考生调剂到西安工程大学环境与化学工程学院
+1/3
-
厦门大学电磁声学研究院 陈雅鸿副教授课题组 新增两名硕士研究生名额
+1/3
-
找好工作来我这-广东唯一石化院校——资源与环境专硕招生
+1/2
-
Top-88悉尼科技大学数据科学/AI 招收2027年入学 校奖 博士生1到2名(国际和本地学生）
+1/1
2楼2012-08-28 20:42:21
10楼2012-08-29 06:23:20
16楼2012-08-29 08:52:28
17楼2012-08-29 08:59:18
20楼2012-08-30 08:35:02
21楼2012-08-31 21:45:31
★
barrey(金币+1): 谢谢参与
barrey(金币+1): 谢谢参与
|
本帖内容被屏蔽 |
22楼2012-08-31 21:57:32
26楼2012-09-03 07:37:49
12楼2012-08-29 07:36:06
简单回复
2012-08-28 21:34
回复
barrey(金币+1): 谢谢参与
2012-08-28 21:41
回复
barrey(金币+1): 谢谢参与
xachenxi5楼
2012-08-28 21:46
回复
barrey(金币+1): 谢谢参与
2012-08-28 22:00
回复
barrey(金币+1): 谢谢参与
2012-08-28 22:29
回复
barrey(金币+1): 谢谢参与
2012-08-28 22:48
回复
barrey(金币+1): 谢谢参与
2012-08-29 05:23
回复
barrey(金币+1): 谢谢参与
userhung11楼
2012-08-29 07:09
回复
barrey(金币+1): 谢谢参与
应用人生13楼
2012-08-29 07:38
回复
barrey(金币+1): 谢谢参与
zhoucb14楼
2012-08-29 07:49
回复
barrey(金币+1): 谢谢参与
yanzongwei15楼
2012-08-29 08:17
回复
barrey(金币+1): 谢谢参与
Ayse18楼
2012-08-29 11:29
回复
barrey(金币+1): 谢谢参与
氢化大雪19楼
2012-08-29 22:02
回复
barrey(金币+1): 谢谢参与
hengab23楼
2012-08-31 22:05
回复
barrey(金币+1): 谢谢参与
秋之落叶24楼
2012-08-31 23:02
回复
barrey(金币+1): 谢谢参与
木米月厷25楼
2012-08-31 23:23
回复
barrey(金币+1): 谢谢参与
20091262227楼
2012-09-03 08:23
回复
barrey(金币+1): 谢谢参与
祝福
lifuqiang928楼
2012-09-03 09:13
回复
barrey(金币+1): 谢谢参与
zfj2011060329楼
2013-05-30 14:52
回复
barrey(金币+1): 谢谢参与
