| 查看: 3337 | 回复: 28 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
请教一个PCR产物直接酶切的问题
|
|||
|
本人最近做PCR产物直接酶切来验证某个基因SNP的差异，野生型中含有可以酶切的一个位点，突变型中不含有酶切位点，PCR反应用全式金的Eco Taq Mix扩增的，片段大小为859bp，见附图中的1,2，3，9,10泳道，限制性内切酶用的不常用的Hpy99I(NEB),PCR产物没有过柱回收，连续做了好几次，用野生型的PCR产物酶切后均没有任何条带，今天酶切条件是25uL体系，2U酶，加了BSA,以第10泳道的PCR产物5uL作为模板酶切（昨天分别做了10uL和15uL的模板浓度，均无酶切条带，所以推测不是模板浓度的问题），酶切结果在第十一泳道，什么条带都没有。 另外，由于该PCR产物中有单一的HindIII酶切位点，因此选择HindIII作为阳性对照，做了平行的酶切反应，酶切结果见泳道4-8. 请问导致这种现象的原因是什么，谢谢。   PCR产物酶切.jpg [ Last edited by barrey on 2012-9-3 at 07:38 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急
已经有9人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急
已经有8人回复
-
售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急
已经有10人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急
已经有9人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有7人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急
已经有9人回复
-
售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有10人回复
-
OpenAI又攻克数学难题了，离AI做有机合成还有多远？
已经有6人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急
已经有10人回复
-
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急
已经有7人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 双酶切问题
已经有15人回复
- 请教一个关于测序结果的问题
已经有19人回复
- PCR产物经酶切电泳后所得的基因型与测序结果不一致，是何原因？该如何处理？
已经有10人回复
- PCR产物凝胶回收、酶切等问题请教
已经有7人回复
- 载体连接pcr片段一直连不上
已经有17人回复
- PCR ， 双酶切，连接问题
已经有17人回复
- 做一个克隆所需的最短时间？比比谁更高效快速！
已经有39人回复
- PCR产物酶切检测不到东西是为什么
已经有11人回复
- 【求助/交流】质粒DNA可以不通过酶切直接跑电泳检测吗？
已经有24人回复
- 【求助/交流】PCR产物测序总是不对
已经有13人回复
- 【求助/交流】PCR引物设计出来了，但酶切之后电泳没条带啊
已经有18人回复
- 【求助/交流】pcr,酶切，连接，哪步可以省？
已经有13人回复
- 克隆基因全长引物设计问题
已经有32人回复
12楼2012-08-29 07:36:06
2楼2012-08-28 20:42:21
10楼2012-08-29 06:23:20
简单回复
2012-08-28 22:00
回复
barrey(金币+1): 谢谢参与
userhung11楼
2012-08-29 07:09
回复
barrey(金币+1): 谢谢参与
