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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 双酶切后是否还要胶回收
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匿名

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1楼 2013-07-31 03:37:18
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
brownwolf1(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-07-31 09:12:48
1.不需要（只要你酶切位点两端部分不大），如果PCR产物够纯，第一次回收都可以不做

2. 再次回收不知道，反正够ligation（胶上能看见，就能连出来，如果片段小有时候看不见都可以）。
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2楼2013-07-31 05:25:19
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匿名

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3楼2013-07-31 11:58:42
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2013-07-31 14:00:20
1 最稳妥的是当然是做DNA clean up

2 如果不做得话 有些公司的（比如NEB的）buffer是可以加ATP和连接酶连接的。 不过之前当然要把内切酶失活（大部分常用酶可以加热失活）。不过没有特殊理由当然还是做clean up
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4楼2013-07-31 12:12:23
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m_marion

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-08-01 10:13:58
有些公司的柱吸附式试剂盒分三种：质粒抽提、胶回收、PCR及酶反应产物纯化。这最后一种就是用来干你要做的事情的——PCR产物纯化、PCR产物酶切以后纯化、PNK反应后纯化、碱性磷酸酶反应后纯化……等等。
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5楼2013-08-01 04:45:37
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