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各种综合问题：酶切 胶回收 质粒浓缩 测浓度
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我要罢工了…… 求助各位虫友： 1.有关双酶切胶回收之后的回收效率问题： EcoRI XhoI 双酶切体系： 酶各2ul BUFFER H 4ul 模板DNA 1ug ddH20 up to 40 ul 酶切 37℃ 4-5h 10Xloading buffer 4ul 终止酶切 跑出来的条带亮 2.用TAKARA做胶回收 3.测浓度-Eppendorf BioPhotometer Plus核酸蛋白测定仪 问题：为什么测出来的是负值？只有0D260 0D280为零 4.有关质粒DNA浓缩 原来是由于提出来的质粒 OD比过大 所以想用乙醇沉淀法浓缩质粒DNA 之前做过相关的实验（当时情况是40ng/ul OD比1.8左右 4支浓缩之后为148ng/ul) 这次做了之后用Eppendorf BioPhotometer Plus核酸蛋白测定仪测浓度 值各种崩溃（有正常的 也有负值 也有无0）为同一批一同沉淀进行的 我不明白是不是其中的实验哪步有差错 但本人确实不太知道 方法：1/10V 醋酸钠 +2.5V冷无水乙醇 -20℃保存30-60min 12000r 离心5-10分钟 弃液 用冷乙醇清洗沉淀 干燥 用30-50ulH20清洗 离心可得。 |
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zhaodahe
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