| 查看: 3423 | 回复: 7 | ||
[求助]
各种综合问题：酶切 胶回收 质粒浓缩 测浓度
|
|
我要罢工了…… 求助各位虫友： 1.有关双酶切胶回收之后的回收效率问题： EcoRI XhoI 双酶切体系： 酶各2ul BUFFER H 4ul 模板DNA 1ug ddH20 up to 40 ul 酶切 37℃ 4-5h 10Xloading buffer 4ul 终止酶切 跑出来的条带亮 2.用TAKARA做胶回收 3.测浓度-Eppendorf BioPhotometer Plus核酸蛋白测定仪 问题：为什么测出来的是负值？只有0D260 0D280为零 4.有关质粒DNA浓缩 原来是由于提出来的质粒 OD比过大 所以想用乙醇沉淀法浓缩质粒DNA 之前做过相关的实验（当时情况是40ng/ul OD比1.8左右 4支浓缩之后为148ng/ul) 这次做了之后用Eppendorf BioPhotometer Plus核酸蛋白测定仪测浓度 值各种崩溃（有正常的 也有负值 也有无0）为同一批一同沉淀进行的 我不明白是不是其中的实验哪步有差错 但本人确实不太知道 方法：1/10V 醋酸钠 +2.5V冷无水乙醇 -20℃保存30-60min 12000r 离心5-10分钟 弃液 用冷乙醇清洗沉淀 干燥 用30-50ulH20清洗 离心可得。 |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有234人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 神奇的质粒提取，花儿一样神奇的单酶切跑胶！
已经有34人回复
- 十万火急，重组质粒酶切只有一条带，测序有结果，但反复说我质粒浓度很低
已经有16人回复
- 关于切胶回收后有质粒污染和拼接PCR涂抹装条带的问题，有点长，呵呵
已经有13人回复
- 【求助/交流】质粒浓度达到多少 测序没有问题
已经有10人回复
zhaodahe
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 220 (大学生)
- 金币: 1796.6
- 红花: 7
- 帖子: 461
- 在线: 378.5小时
- 虫号: 552612
- 注册: 2008-04-30
- 性别: GG
- 专业: 微生物遗传学
2楼2012-11-28 19:07:24
3楼2012-11-28 22:45:54
zhaodahe
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 220 (大学生)
- 金币: 1796.6
- 红花: 7
- 帖子: 461
- 在线: 378.5小时
- 虫号: 552612
- 注册: 2008-04-30
- 性别: GG
- 专业: 微生物遗传学
4楼2012-11-29 00:11:05
5楼2012-11-29 05:09:02
chenguestc
木虫 (职业作家)
- MolEPI: 7
- 应助: 576 (博士)
- 贵宾: 0.4
- 金币: 4526.9
- 散金: 1639
- 红花: 176
- 帖子: 4708
- 在线: 353.5小时
- 虫号: 1337860
- 注册: 2011-07-05
- 性别: GG
- 专业: 作物分子育种
6楼2012-11-29 08:52:33
7楼2012-11-30 17:33:06
8楼2012-11-30 17:33:45
投票:
10