| 查看: 2893 | 回复: 7 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
各种综合问题：酶切 胶回收 质粒浓缩 测浓度
|
||
|
我要罢工了…… 求助各位虫友： 1.有关双酶切胶回收之后的回收效率问题： EcoRI XhoI 双酶切体系： 酶各2ul BUFFER H 4ul 模板DNA 1ug ddH20 up to 40 ul 酶切 37℃ 4-5h 10Xloading buffer 4ul 终止酶切 跑出来的条带亮 2.用TAKARA做胶回收 3.测浓度-Eppendorf BioPhotometer Plus核酸蛋白测定仪 问题：为什么测出来的是负值？只有0D260 0D280为零 4.有关质粒DNA浓缩 原来是由于提出来的质粒 OD比过大 所以想用乙醇沉淀法浓缩质粒DNA 之前做过相关的实验（当时情况是40ng/ul OD比1.8左右 4支浓缩之后为148ng/ul) 这次做了之后用Eppendorf BioPhotometer Plus核酸蛋白测定仪测浓度 值各种崩溃（有正常的 也有负值 也有无0）为同一批一同沉淀进行的 我不明白是不是其中的实验哪步有差错 但本人确实不太知道 方法：1/10V 醋酸钠 +2.5V冷无水乙醇 -20℃保存30-60min 12000r 离心5-10分钟 弃液 用冷乙醇清洗沉淀 干燥 用30-50ulH20清洗 离心可得。 |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有168人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
神奇的质粒提取，花儿一样神奇的单酶切跑胶！
已经有34人回复- 十万火急，重组质粒酶切只有一条带，测序有结果，但反复说我质粒浓度很低
已经有16人回复
- 关于切胶回收后有质粒污染和拼接PCR涂抹装条带的问题，有点长，呵呵
已经有13人回复
- 【求助/交流】质粒浓度达到多少 测序没有问题
已经有10人回复
3楼2012-11-28 22:45:54
zhaodahe
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 220 (大学生)
- 金币: 1796.6
- 红花: 7
- 帖子: 461
- 在线: 378.5小时
- 虫号: 552612
- 注册: 2008-04-30
- 性别: GG
- 专业: 微生物遗传学
2楼2012-11-28 19:07:24
zhaodahe
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 220 (大学生)
- 金币: 1796.6
- 红花: 7
- 帖子: 461
- 在线: 378.5小时
- 虫号: 552612
- 注册: 2008-04-30
- 性别: GG
- 专业: 微生物遗传学
4楼2012-11-29 00:11:05
5楼2012-11-29 05:09:02