24小时热门版块排行榜    

查看: 4802  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

hylee103

金虫 (正式写手)

[求助] 酶切产物能直接做连接反应吗

酶切产物,不做胶回收,直接做连接反应,是否可行?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
hylee103: 金币+1, 有帮助 2013-03-21 14:17:05
hylee103: 金币+1, 有帮助 2013-07-02 21:57:55
看你怎么切的,柱子可以洗掉和primer大小相仿的DNA(大概60-70bp),来源于pcr得话模板少加点,或者加DpnI一起切都行。
如果一部分来自pcr一部分来自质粒得话可以做去磷酸化,搞清楚原理自己决定好了
4楼2013-03-21 12:10:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

xy656691

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励应助! 2013-03-21 11:19:55
hylee103: 金币+1, 有帮助 2013-03-21 14:15:45
hylee103: 金币+1, 有帮助 2013-07-02 21:57:27
不可行,假阳性太高了。你切开的质粒会重新连在一起的
2楼2013-03-21 08:43:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cucu奶茶

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
hylee103: 金币+1, 有帮助 2013-03-21 14:15:52
同意二楼的。你得到的转化子不好鉴定是目的片段还是非目的片段。还是得用回收产物做鉴定。
3楼2013-03-21 09:12:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
hylee103: 金币+1, 有帮助 2013-03-22 14:42:37
如果是从质粒上切下来的不行,片段会连回到原来的载体里。如果是PCR产物是可以的。连接前要把限制性内切酶失活。对于不能加热失活的酶,不要用直接连。
5楼2013-03-22 02:51:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿东华大学化学070300,求调剂 +6 2117205181 2026-03-21 7/350 2026-03-22 14:59 by allen-yin
[考研] 求调剂 +5 Zhangbod 2026-03-21 7/350 2026-03-22 13:13 by Zhangbod
[考博] 招收博士1-2人 +3 QGZDSYS 2026-03-18 4/200 2026-03-22 10:25 by QGZDSYS
[考研] 初试 317 +7 半拉月丙 2026-03-20 7/350 2026-03-21 22:26 by peike
[考研] 【考研调剂】化学专业 281分,一志愿四川大学,诚心求调剂 +11 吃吃吃才有意义 2026-03-19 11/550 2026-03-21 18:23 by 学员8dgXkO
[考研] 302求调剂 +12 呼呼呼。。。。 2026-03-17 12/600 2026-03-21 17:29 by ColorlessPI
[考研] 296求调剂 +4 www_q 2026-03-20 4/200 2026-03-21 17:26 by 学员8dgXkO
[考研] 22 350 本科985求调剂,求老登收留 +3 李轶男003 2026-03-20 3/150 2026-03-21 13:28 by 搏击518
[考研] 332求调剂 +3 凤凰院丁真 2026-03-20 3/150 2026-03-21 10:27 by luoyongfeng
[考研] 求调剂 +6 Mqqqqqq 2026-03-19 6/300 2026-03-21 08:04 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武理材料305分求调剂 +6 想上岸的鲤鱼 2026-03-18 7/350 2026-03-21 01:03 by JourneyLucky
[考研] 南京大学化学376求调剂 +3 hisfailed 2026-03-19 6/300 2026-03-20 23:43 by hisfailed
[考研] 324求调剂 +5 lucky呀呀呀鸭 2026-03-20 5/250 2026-03-20 22:30 by 促天成
[考研] 085600材料与化工 +8 安全上岸! 2026-03-16 8/400 2026-03-20 22:13 by luoyongfeng
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
[考研] 295材料求调剂,一志愿武汉理工085601专硕 +5 Charlieyq 2026-03-19 5/250 2026-03-20 20:35 by JourneyLucky
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂(0854都可以) +4 xbxudjdn 2026-03-18 4/200 2026-03-20 09:07 by 不168
[考研] 一志愿福大288有机化学,求调剂 +3 小木虫200408204 2026-03-18 3/150 2026-03-19 13:31 by houyaoxu
[考研] 材料,纺织,生物(0856、0710),化学招生啦 +3 Eember. 2026-03-17 9/450 2026-03-18 10:28 by Eember.
[考博] 26申博 +4 八6八68 2026-03-16 4/200 2026-03-17 13:00 by 轻松不少随
信息提示
请填处理意见