| 查看: 1732 | 回复: 11 | |||
[交流]
AFLP酶切连接 求高人指点啊已有5人参与
|
最近做AFLP酶切连接的条件摸索，我用的是植物材料 DNA提取的结果OD260/280都在1.8左右，双酶切用的NEB的EcoRI 和Mse I，酶切分别做了1-6h的梯度，DNA加了400ng左右，没有做DNA的梯度，用的酶切体系是20微升的，但是酶切结果 跑电泳之后，隐隐约约能看到弥散，这几个时间没什么区别，上样量已经用了10微升，但还是看不出来什么，试着做了一下连接，之后做的PCR，结果如果，不知道酶切的问题究竟该怎么解决，连接产物跑电泳也很不理想，如图，请高人指导啊 PCR结果  酶切连接结果电泳图 |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有222人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
金属的成形性与塑性有啥区别，求高人指点。
已经有19人回复- 本人做了双酶切连接转化，真的真的有想死的心了
已经有6人回复
- 请问cDNA-AFLP中酶切的问题，谢谢大家
已经有7人回复
- 求高人指点gas-phase grafting与气相沉积有什么区别？如何操作？
已经有3人回复
- 测定β-半乳糖苷酶酶活为什么重复性差？？求高人指点
已经有17人回复
- 基因克隆中酶切连接问题
已经有13人回复
- 双酶切连接表达载体，两个月都没做出来，问题到底出在哪里呢~？求指点
已经有52人回复
- 从连接中点开的网页总是空白，怎么解决，请高人指点~
已经有4人回复
- 【分享】分子克隆实验专题-（二）酶切连接要点探讨
已经有15人回复
- 【求助/交流】AFLP求助，选扩始终不能扩出条带，有图
已经有13人回复
- 【求助/交流】AFLP选扩产物弥散，请做过AFLP的同行们耽误几分钟帮忙看看
已经有5人回复
- 【求助】请高人指点
已经有8人回复
- 【求助/交流】AFLP
已经有15人回复
2楼2011-11-30 10:14:31
3楼2011-11-30 11:05:16
schkk
至尊木虫 (正式写手)
- 应助: 10 (幼儿园)
- 金币: 10722.5
- 红花: 1
- 帖子: 993
- 在线: 123.2小时
- 虫号: 230465
- 注册: 2006-03-26
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
4楼2011-12-05 19:34:04
5楼2011-12-05 20:38:07
6楼2011-12-05 21:33:23
schkk
至尊木虫 (正式写手)
- 应助: 10 (幼儿园)
- 金币: 10722.5
- 红花: 1
- 帖子: 993
- 在线: 123.2小时
- 虫号: 230465
- 注册: 2006-03-26
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
7楼2011-12-05 21:55:16
8楼2011-12-06 10:12:54
9楼2011-12-06 10:14:01
10楼2011-12-21 11:59:15