24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1919  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

wskxbxf

新虫 (小有名气)

[交流] AFLP酶切连接 求高人指点啊 已有5人参与

最近做AFLP酶切连接的条件摸索,我用的是植物材料 DNA提取的结果OD260/280都在1.8左右,双酶切用的NEB的EcoRI 和Mse I,酶切分别做了1-6h的梯度,DNA加了400ng左右,没有做DNA的梯度,用的酶切体系是20微升的,但是酶切结果 跑电泳之后,隐隐约约能看到弥散,这几个时间没什么区别,上样量已经用了10微升,但还是看不出来什么,试着做了一下连接,之后做的PCR,结果如果,不知道酶切的问题究竟该怎么解决,连接产物跑电泳也很不理想,如图,请高人指导啊

PCR结果



酶切连接结果电泳图
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wskxbxf

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by schkk at 2011-12-05 21:55:16:
那你作选扩吧,应该没什么问题,预扩弥散的状态看着不错,等把选扩作完了上结果再分析吧,现在看不出来什么的,连接后电泳是没什么可看的,量太小了,除非你浓缩一下后再电泳

谢谢指导,最近准备做选扩,到时候再分析一下。
9楼2011-12-06 10:14:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

wskxbxf

新虫 (小有名气)

引用回帖:
1楼: Originally posted by wskxbxf at 2011-11-29 20:09:10:
最近做AFLP酶切连接的条件摸索,我用的是植物材料 DNA提取的结果OD260/280都在1.8左右,双酶切用的NEB的EcoRI 和Mse I,酶切分别做了1-6h的梯度,DNA加了400ng左右,没有做DNA的梯度,用的酶切体系是20微升的,但 ...

没有高人指点 哎
2楼2011-11-30 10:14:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

7788945

银虫 (小有名气)

非高人想指点,但是。。
3楼2011-11-30 11:05:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

schkk

至尊木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
PCR图是预扩增还是选择性扩增的结果啊?这个实验最后需要用大板的PAGE的测序胶作电泳的,琼脂糖分辩率不够,跑的效果基本也就这样了
4楼2011-12-05 19:34:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 322求调剂:一志愿湖南大学 材料与化工(085600),已过六级。 +7 XX小邓 2026-03-29 7/350 2026-03-30 16:50 by asdfzly
[考研] 26考研-291分-厦门大学(085601)-柔性电子学院材料工程专业求调剂 +4 min3 2026-03-24 5/250 2026-03-30 16:41 by 梨子~
[考研] 266分,求材料相关专业调剂 +4 哇呼哼呼哼 2026-03-30 4/200 2026-03-30 16:17 by wangjy2002
[考研] 300求调剂,材料科学英一数二 +18 leaflight 2026-03-24 18/900 2026-03-30 15:59 by wangjy2002
[考研] 284求调剂 +14 junqihahaha 2026-03-26 15/750 2026-03-30 14:12 by 探123
[考研] 277跪求调剂 +7 1915668 2026-03-27 11/550 2026-03-30 12:49 by fangnagu
[考研] 生物技术与工程 +7 1294608413 2026-03-25 8/400 2026-03-30 11:36 by 唐沐儿
[考研] 297求调剂 +13 田洪有 2026-03-26 13/650 2026-03-30 11:33 by 替代品000
[考研] 085600材料与化工调剂 +6 kikiki7 2026-03-30 6/300 2026-03-30 10:57 by 星空星月
[考研] 318求调剂 +7 陈晨79 2026-03-30 7/350 2026-03-30 10:49 by 探123
[考研] 求调剂 +10 张zz111 2026-03-27 11/550 2026-03-30 09:17 by 无际的草原
[考研] 各位老师好,我的一志愿为北京科技大学085601材料专硕 +9 Koxui 2026-03-28 9/450 2026-03-29 20:43 by 无际的草原
[考研] 一志愿太原理工安全工程300分,求调剂 +5 0857求调剂. 2026-03-24 6/300 2026-03-28 22:04 by zhq0425
[考研] 311(085601)求调剂 +4 liziyeyeye 2026-03-28 4/200 2026-03-28 18:50 by 535743368
[考研] 材料277求调剂 +7 min3 2026-03-24 7/350 2026-03-28 11:39 by xuxiang
[考研] 085405 考的11408求各位老师带走 +3 Qiu学ing 2026-03-28 3/150 2026-03-28 09:19 by 乐呵呵的追梦人
[考研] 求调剂 +6 林之夕 2026-03-24 6/300 2026-03-27 08:38 by hypershenger
[考研] 327求调剂 +7 prayer13 2026-03-23 7/350 2026-03-26 20:48 by 不吃魚的貓
[考研] 296求调剂 +4 汪!?! 2026-03-25 7/350 2026-03-25 16:41 by 汪!?!
[考研] 求调剂 +3 李李不服输 2026-03-25 3/150 2026-03-25 13:03 by cmz0325
信息提示
请填处理意见