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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】AFLP
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xyls6868

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】AFLP 已有7人参与

请教各位大侠，有谁遇到过，大板上的条带有只有几个比较明显比较粗，而大多数条带都模糊不清的现象没？
  这种现象应该是pcr效率有问题吧，但是问题在哪呢？
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1楼 2010-05-12 09:38:12
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lyg7720349

铜虫 (小有名气)
你跑的是那种胶呢？
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望大家都各有所获！
2楼2010-05-12 14:09:30
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xyls6868

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by lyg7720349 at 2010-05-12 14:09:30:
你跑的是那种胶呢？

聚丙烯酰胺凝胶电泳
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3楼2010-05-12 19:01:34
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zhwenxing

木虫 (著名写手)

尛森蟲
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):欢迎多多交流 2010-05-12 22:08:38
1、注意电压电流
2、注意凝胶的浓度是否合适。
3、注意上样量。
4、PCR加阳性对照和阴性对照。
5、跑胶温度。
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2010-05-12 19:50:22
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xyls6868

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by zhwenxing at 2010-05-12 19:50:22:
1、注意电压电流
2、注意凝胶的浓度是否合适。
3、注意上样量。
4、PCR加阳性对照和阴性对照。
5、跑胶温度。

请问一下大侠，你的以上各个要素的数量值各是多少呢？
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5楼2010-05-12 19:55:14
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xyls6868

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by xyls6868 at 2010-05-12 19:55:14:

请问一下大侠，你的以上各个要素的数量值各是多少呢？

能参考一下吗？最近实在是迷茫呵呵。谢谢
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6楼2010-05-12 19:59:08
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zhwenxing

木虫 (著名写手)

尛森蟲
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+1):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-05-12 23:24:03
要是有师兄姐做过的话，参考一下，每个实验室的仪器也有差异。
根据分子克隆做一下。
自己尝试改变几个参数试试看。
赞一下(2人) 回复此楼
7楼2010-05-12 20:05:52
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+1):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-05-12 23:24:10
这种现象如果你的marker没有问题，百分之百是你的AFLP还没有做好，就是说任何环节都有可能有问题，不过我认为预扩和选扩一般问题不是很大，还是酶切连接的问题
赞一下(2人) 回复此楼
8楼2010-05-12 22:59:13
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xyls6868

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-05-12 22:59:13:
这种现象如果你的marker没有问题，百分之百是你的AFLP还没有做好，就是说任何环节都有可能有问题，不过我认为预扩和选扩一般问题不是很大，还是酶切连接的问题

但是酶切连接的结果该检测成什么样才算是结果比较好呢？
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9楼2010-05-13 09:05:20
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):欢迎多多交流~~ 2010-05-25 15:09:59
引用回帖:
Originally posted by xyls6868 at 2010-05-13 09:05:20:

但是酶切连接的结果该检测成什么样才算是结果比较好呢？

酶切连接就是弥散带，连接后能看到引物带，预扩之后的条带是在500最亮，向两侧发散

[ Last edited by yujiaping1 on 2010-5-13 at 19:57 ]
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zhangyonghu
10楼2010-05-13 19:55:23
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