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xyls6868

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】AFLP 已有7人参与

请教各位大侠,有谁遇到过,大板上的条带有只有几个比较明显比较粗,而大多数条带都模糊不清的现象没?
  这种现象应该是pcr效率有问题吧,但是问题在哪呢?
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lyg7720349

铜虫 (小有名气)

你跑的是那种胶呢?
望大家都各有所获!
2楼2010-05-12 14:09:30
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xyls6868

新虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by lyg7720349 at 2010-05-12 14:09:30:
你跑的是那种胶呢?

聚丙烯酰胺凝胶电泳
3楼2010-05-12 19:01:34
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zhwenxing

木虫 (著名写手)

尛森蟲

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):欢迎多多交流 2010-05-12 22:08:38
1、注意电压电流
2、注意凝胶的浓度是否合适。
3、注意上样量。
4、PCR加阳性对照和阴性对照。
5、跑胶温度。
4楼2010-05-12 19:50:22
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xyls6868

新虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by zhwenxing at 2010-05-12 19:50:22:
1、注意电压电流
2、注意凝胶的浓度是否合适。
3、注意上样量。
4、PCR加阳性对照和阴性对照。
5、跑胶温度。

请问一下大侠,你的以上各个要素的数量值各是多少呢?
5楼2010-05-12 19:55:14
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xyls6868

新虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by xyls6868 at 2010-05-12 19:55:14:

请问一下大侠,你的以上各个要素的数量值各是多少呢?

能参考一下吗?最近实在是迷茫呵呵。谢谢
6楼2010-05-12 19:59:08
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zhwenxing

木虫 (著名写手)

尛森蟲

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+1):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-05-12 23:24:03
要是有师兄姐做过的话,参考一下,每个实验室的仪器也有差异。
根据分子克隆做一下。
自己尝试改变几个参数试试看。
7楼2010-05-12 20:05:52
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yujiaping1

木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+1):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-05-12 23:24:10
这种现象如果你的marker没有问题,百分之百是你的AFLP还没有做好,就是说任何环节都有可能有问题,不过我认为预扩和选扩一般问题不是很大,还是酶切连接的问题
8楼2010-05-12 22:59:13
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xyls6868

新虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-05-12 22:59:13:
这种现象如果你的marker没有问题,百分之百是你的AFLP还没有做好,就是说任何环节都有可能有问题,不过我认为预扩和选扩一般问题不是很大,还是酶切连接的问题

但是酶切连接的结果该检测成什么样才算是结果比较好呢?
9楼2010-05-13 09:05:20
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yujiaping1

木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):欢迎多多交流~~ 2010-05-25 15:09:59
引用回帖:
Originally posted by xyls6868 at 2010-05-13 09:05:20:

但是酶切连接的结果该检测成什么样才算是结果比较好呢?

酶切连接就是弥散带,连接后能看到引物带,预扩之后的条带是在500最亮,向两侧发散

[ Last edited by yujiaping1 on 2010-5-13 at 19:57 ]

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

10楼2010-05-13 19:55:23
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