24小时热门版块排行榜    

查看: 2658  |  回复: 16

lifeileif

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】Takara试剂盒,合成cDNA看不到弥散,着急啊 已有8人参与

我现在也在做cDNA-AFLP,用Takara试剂盒,货号D6130。我合成cDNA时候,遇到了的问题。第一链合成后,检测结果竟然和RNA电泳图差不多,隐约能看到两条带,分子量和rna也差不多,没有弥散,除了那两条模糊的带,什么都看不见。做了几次结果都差不多。万分着急,希望大侠们能帮我解决。着急中

图片,左面是提的RNA,右边mark后第一孔就是第一链了,第二孔是第二链,什么都看不到。求救啊,感谢感谢

附图
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

吉他,计算机
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

gastrodia

金虫 (正式写手)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
mRNA只占总RNA的1%左右,而且是n多条混合物,你想反转录后就可以看到的可能性不大,直接切了加接头,预扩增之后才可以看的到条带,我觉得你还是先按照试剂盒的说明做下去才好
10楼2010-04-29 16:52:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)


★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
KIT ,你做不好的话,就不知道为什么了,或者你的RNA本身就有问题
2楼2010-04-29 10:33:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

poog502

木虫 (正式写手)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我之前用TaKaRa的效果也不好,后来换了fermentas的反转录酶一下就做出来了,建议试试
3楼2010-04-29 10:41:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)


很久很久以前,我好像用的普洛麦格的,很不错
4楼2010-04-29 10:55:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lifeileif

新虫 (初入文坛)

感谢楼上大仙们,是不是我的RNA浓度低啊
吉他,计算机
5楼2010-04-29 13:11:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)

我觉得cDNA不用检测,往下做做,也许没有问题
6楼2010-04-29 15:04:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lifeileif

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-04-29 15:04:14:
我觉得cDNA不用检测,往下做做,也许没有问题

合成第一第二链都不要检测吗?cDNA要是看不到,哪酶切怎么检测啊?
吉他,计算机
7楼2010-04-29 16:45:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)


★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
慢慢来
8楼2010-04-29 16:50:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

poog502

木虫 (正式写手)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2010-04-29 10:55:38:
很久很久以前,我好像用的普洛麦格的,很不错

是promega把,晕死
9楼2010-04-29 16:51:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lifeileif 的主题更新
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:47 by yCO1Ll7aHtsw
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:37 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 16:30 by etmYJ6d2rquH
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 16:03 by etmYJ6d2rquH
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 15:46 by etmYJ6d2rquH
[论文投稿] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 4/200 2026-09-29 15:15 by etmYJ6d2rquH
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:58 by etmYJ6d2rquH
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:30 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 7/350 2026-09-29 14:07 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 3/150 2026-09-29 13:56 by etmYJ6d2rquH
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 09:59 by JzYBbHIXWSrW
[教师之家] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 4/200 2026-09-29 09:49 by JzYBbHIXWSrW
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:42 by ZvyPK8n6Nfki
[找工作] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:28 by ZvyPK8n6Nfki
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:46 by b8fCuTHqckEt
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[有机交流] 同一个分子,一条来自文献,一条来自AI——不告诉你答案,你会选哪条? +3 tianxiaoxian 2026-09-28 6/300 2026-09-28 22:44 by tianxiaoxian
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-28 22:15 by ez6fGg9abYaj
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 18:51 by 9lS3ad5oOymn
信息提示
请填处理意见