24小时热门版块排行榜    

查看: 2196  |  回复: 16

lifeileif

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】Takara试剂盒,合成cDNA看不到弥散,着急啊 已有8人参与

我现在也在做cDNA-AFLP,用Takara试剂盒,货号D6130。我合成cDNA时候,遇到了的问题。第一链合成后,检测结果竟然和RNA电泳图差不多,隐约能看到两条带,分子量和rna也差不多,没有弥散,除了那两条模糊的带,什么都看不见。做了几次结果都差不多。万分着急,希望大侠们能帮我解决。着急中

图片,左面是提的RNA,右边mark后第一孔就是第一链了,第二孔是第二链,什么都看不到。求救啊,感谢感谢

附图
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

吉他,计算机
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

gastrodia

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
mRNA只占总RNA的1%左右,而且是n多条混合物,你想反转录后就可以看到的可能性不大,直接切了加接头,预扩增之后才可以看的到条带,我觉得你还是先按照试剂盒的说明做下去才好
10楼2010-04-29 16:52:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
KIT ,你做不好的话,就不知道为什么了,或者你的RNA本身就有问题
2楼2010-04-29 10:33:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

poog502

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我之前用TaKaRa的效果也不好,后来换了fermentas的反转录酶一下就做出来了,建议试试
3楼2010-04-29 10:41:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)


很久很久以前,我好像用的普洛麦格的,很不错
4楼2010-04-29 10:55:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lifeileif

新虫 (初入文坛)

感谢楼上大仙们,是不是我的RNA浓度低啊
吉他,计算机
5楼2010-04-29 13:11:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)

我觉得cDNA不用检测,往下做做,也许没有问题
6楼2010-04-29 15:04:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lifeileif

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-04-29 15:04:14:
我觉得cDNA不用检测,往下做做,也许没有问题

合成第一第二链都不要检测吗?cDNA要是看不到,哪酶切怎么检测啊?
吉他,计算机
7楼2010-04-29 16:45:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
慢慢来
8楼2010-04-29 16:50:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

poog502

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2010-04-29 10:55:38:
很久很久以前,我好像用的普洛麦格的,很不错

是promega把,晕死
9楼2010-04-29 16:51:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lifeileif 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 考研化学学硕调剂,一志愿985 +3 张vvvv 2026-03-15 5/250 2026-03-16 20:25 by 张vvvv
[考研] 304求调剂 +5 素年祭语 2026-03-15 5/250 2026-03-16 17:00 by 我的船我的海
[考研] 0703化学调剂,求各位老师收留 +8 秋有木北 2026-03-14 8/400 2026-03-16 15:21 by 哦哦123
[考研] 070303 总分349求调剂 +3 LJY9966 2026-03-15 5/250 2026-03-16 14:24 by xwxstudy
[考研] 材料工程专硕274一志愿211求调剂 +5 薛云鹏 2026-03-15 5/250 2026-03-15 20:38 by Logic2024
[考研] 289求调剂 +5 步川酷紫123 2026-03-11 5/250 2026-03-15 00:45 by kruisytel
[考研] 材料与化工 323 英一+数二+物化,一志愿:哈工大 本人本科双一流 +4 自由的_飞翔 2026-03-13 5/250 2026-03-14 19:39 by hmn_wj
[考研] 308 085701 四六级已过求调剂 +7 温乔乔乔乔 2026-03-12 14/700 2026-03-14 10:49 by JourneyLucky
[考研] 2026考研调剂+本科延边大学+山东大学+生物化学与分子生物学+有项目经验 +3 ccdsscjy 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:12 by JourneyLucky
[考研] 341求调剂 +4 番茄头--- 2026-03-10 4/200 2026-03-13 23:12 by JourneyLucky
[考研] 0703化学调剂 +4 快乐的香蕉 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:41 by JourneyLucky
[考研] 26调剂/材料科学与工程/总分295/求收留 +9 2026调剂侠 2026-03-12 9/450 2026-03-13 20:46 by 18595523086
[考研] 301求调剂 +6 Liyouyumairs 2026-03-11 6/300 2026-03-13 20:11 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +7 18880831720 2026-03-11 7/350 2026-03-13 16:10 by JourneyLucky
[考研] 08食品或轻工求调剂,本科发表3篇sci一区top论文,一志愿南师大食品科学与工程 +3 我是一个兵, 2026-03-10 3/150 2026-03-13 10:21 by Yuyi.
[考博] 2026年博士申请 +3 QwQwQW10 2026-03-11 3/150 2026-03-12 17:58 by gxch43
[考研] 研究生招生 +3 徐海涛11 2026-03-10 7/350 2026-03-12 14:26 by 徐海涛11
[基金申请] 提交后的基金本子,已让学校撤回了,可否换口子提交 +3 dut_pfx 2026-03-10 3/150 2026-03-11 08:38 by kudofaye
[考研] 调剂 +5 呵唔哦豁 2026-03-10 5/250 2026-03-10 22:00 by 28375m
[考博] 26申博求助 +3 跳跃饼干 2026-03-10 4/200 2026-03-10 21:15 by Tntcnn
信息提示
请填处理意见