24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1856  |  回复: 13

swul_benben

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】AFLP求助,选扩始终不能扩出条带,有图 已有9人参与

选扩到聚丙烯上始终没有带,附上图,包括预扩检验(琼脂糖,聚丙烯),选扩检验(琼脂糖,聚丙烯)。图依次是预扩琼脂糖,预扩聚丙烯,选扩琼脂糖,选扩聚丙烯。求高人帮助啊。。。。








[ Last edited by swul_benben on 2010-12-10 at 12:38 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

green1223

木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我们遇到的这种情况  最后确定是引物的问题
10楼2011-01-16 20:29:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

swul_benben

新虫 (初入文坛)

有没有人能帮帮忙啊,有了解的人么??
2楼2010-12-10 15:25:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

swul_benben

新虫 (初入文坛)

哎。难道没有人知道的么。。。。。
3楼2010-12-10 15:28:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

changes

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+2):鼓励交流! 2010-12-10 20:40:38
这个问题可能因素多一些。
1. 预扩、选扩的琼脂糖上样是几微升?
2. 预扩是酶连产物直接扩增的吗?加了几微升为模板。
3. 选扩时用的预扩产物稀释了多少倍?感觉你的预扩产物挺亮的,但是不知道上述1.2的用量,因此不好估计。
4. 你跑的变性胶浓度是多大的?胶的厚度和长度是多少?因为看起来挺厚的。我以前用的是六一厂的垂直板,长板跑过。
4楼2010-12-10 20:14:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

swul_benben

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by changes at 2010-12-10 20:14:16:
这个问题可能因素多一些。
1. 预扩、选扩的琼脂糖上样是几微升?
2. 预扩是酶连产物直接扩增的吗?加了几微升为模板。
3. 选扩时用的预扩产物稀释了多少倍?感觉你的预扩产物挺亮的,但是不知道上述1.2的用量, ...

多谢回复
1.预扩和选扩上样都是5微升。
2.是T4连接产物直接扩增的,25微升体系加了3微升为模板
3.选扩时稀释从200倍到20倍不等,都几乎没有带,但是选扩产物点到琼脂糖上居然2000以上很亮,见图,很是奇怪啊。。
4.我跑的是非变性胶,准备有带以后再上变性胶,是一毫米的板。

[ Last edited by swul_benben on 2010-12-11 at 11:06 ]
5楼2010-12-11 10:32:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

swul_benben

新虫 (初入文坛)

大家都来说说到底是啥问题啊,难道是选扩引物的问题。。
6楼2010-12-11 11:07:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
建议你将预扩也做个模板梯度
甚至酶切连接也要做模板梯度
另外注意预扩增和选扩增的两个引物用量是有比例的,多位点酶切引物分别是稀有位点酶切引物的10倍、6倍,接头也是10倍的比例
7楼2010-12-11 11:18:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huizipinggon

铜虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by swul_benben at 2010-12-10 12:36:15:
选扩到聚丙烯上始终没有带,附上图,包括预扩检验(琼脂糖,聚丙烯),选扩检验(琼脂糖,聚丙烯)。图依次是预扩琼脂糖,预扩聚丙烯,选扩琼脂糖,选扩聚丙烯。求高人帮助啊。。。。



[img]http://pic.emu ...

酶切连接一起做的么?
我做的预扩和选扩跟你的“选扩琼脂糖”的图一样,弥散,不知道怎么回事。是不是不用试剂盒的话,得分步切啊?
走自己的路,让别人去说吧
8楼2011-01-05 13:55:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cond

银虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我最近做cDNA --AFLP和你遇到同样的问题,你解决吗
9楼2011-01-16 20:19:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 swul_benben 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 285求调剂 +12 哦呦呼o 2026-04-04 12/600 2026-04-06 09:48 by 蓝云思雨
[考研] 0703求调剂383分 +9 W55j 2026-04-03 9/450 2026-04-06 06:50 by houyaoxu
[考研] 调剂 +7 不逢春 2026-04-05 8/400 2026-04-05 23:34 by 来看流星雨10
[考研] 086000生物与医药298调剂求助 +9 元元青青 2026-03-31 12/600 2026-04-05 21:03 by 学员8dgXkO
[考研] 求调剂 +10 Hll胡 2026-04-04 10/500 2026-04-05 20:09 by nepu_uu
[考研] 材料调剂 +13 一样YWY 2026-04-03 14/700 2026-04-05 18:20 by 蓝云思雨
[考研] 调剂 +5 好好读书。 2026-04-01 5/250 2026-04-05 17:54 by liucky
[考研] 考研生物学考A区211,初试322,科目生化和生物综合,求调剂 +6 。。。54 2026-04-03 6/300 2026-04-05 14:54 by JOKER0401
[考研] 085410人工智能 初试316分 求调剂 +6 残星拂曙 2026-03-31 6/300 2026-04-05 12:15 by rainbow11
[考研] 一志愿西北农林畜牧专硕336分求调剂 +3 5ourr 2026-04-03 3/150 2026-04-05 10:40 by JOKER0401
[考研] 283求调剂 +10 A child 2026-04-04 10/500 2026-04-05 08:22 by qlm5820
[考研] 315求调剂 +13 小羊小羊_ 2026-04-02 14/700 2026-04-04 20:30 by 蓝云思雨
[考研] 考研调剂 +8 不爱喝饮料 2026-04-03 8/400 2026-04-03 16:40 by Mistake-J
[基金申请] 请问共同通讯和共同一作的认可度问题 10+4 psa1234 2026-04-01 10/500 2026-04-03 11:08 by Kittylucky
[考研] 一志愿安徽大学0817化学工程与技术,求调剂 +14 我不是只因 2026-04-02 15/750 2026-04-03 09:49 by 蓝云思雨
[考研] 372求调剂 +3 jj涌77 2026-04-02 3/150 2026-04-02 09:57 by olim
[考研] 377求调剂 +3 RASKIN 2026-04-02 3/150 2026-04-02 09:45 by zzchen2000
[考研] 349求调剂 +6 吃的不少 2026-04-01 6/300 2026-04-01 17:55 by JYD2011
[考研] 一志愿大连理工大学,机械工程学硕,341 +3 西瓜田的守望者 2026-03-30 3/150 2026-03-31 11:08 by asdfzly
[考研] 本科211总分289,08工学真心求调剂 +3 utopiaE 2026-03-30 3/150 2026-03-30 23:42 by ms629
信息提示
请填处理意见