| 查看: 5104 | 回复: 15 | |||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[求助]
PCR无任何条带，完全是空白胶
|
|||
我最近做PCR时，模板是基因组，电泳图除了Marker外，其他的一丁点条带都没有，完全是空白胶。我把所有体系全换新的，仍然没有，现在怀疑是引物问题，想验证下引物。打算用高浓度的琼脂胶（3%）来跑胶，能验证吗？  [ Last edited by 武荷花S on 2011-5-29 at 22:25 ] |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜欢
氢氧化钾活化操作
已经有19人回复
-
散金
已经有68人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有218人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
-
ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析
已经有0人回复
-
AM630（CAS 164178-33-0）：CB2 选择性配体的实验使用与供应要点
已经有0人回复
-
ADC标杆分子T-DM1全解析：从结构设计到实验室应用的技术要点
已经有0人回复
-
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？
已经有0人回复
-
His标签蛋白纯化怎么才能快？
已经有0人回复
-
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析
已经有0人回复
-
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 为啥RT-PCR的空白对照也出现了目的条带？
已经有9人回复
- 求助大神们 CDNA片段PCR扩增之后没有目的条带 全是拖带
已经有11人回复
- 阴性对照扩增出条带
已经有4人回复
- PCR后跑胶没有任何条带
已经有49人回复
- DGGE切胶条带PCR产物弥散
已经有11人回复
- PCR扩增空白有条带
已经有13人回复
- PCR结果出现弥散现象
已经有21人回复
- 荧光定量PCR扩增效率低
已经有16人回复
- 挑单克隆后，菌液PCR检测所有条带都偏小，目的条带没有出现
已经有9人回复
- PCR产物鉴定时有目的条带，跑回收胶时却没有目的条带，这是为什么？
已经有15人回复
- PCR空白跑出了与目的基因一样的一条浅带
已经有16人回复
- 最近RT-PCR能够出来内参，却没有目的条带，请各位高手帮忙
已经有9人回复
- PCR批出非目标带，空白对照都有，重复进行，有时有，有时没有，咋回事？
已经有8人回复
- PCR实验前，模板DNA浓度的确定
已经有6人回复
- SOE pcr目的条带很暗，非特异条带很亮？
已经有10人回复
- 胶回收后再次pcr无目的条带，急，望神人指点。。。
已经有16人回复
- PCR条带为什么会出现引物二聚体呀？目的条带没有出现。新手不大懂~~~
已经有9人回复
- PCR样品不在一块胶上，怎么统计条带啊，烦的要死
已经有11人回复
- 空白也PCR出的两条带
已经有19人回复
- 自己做的PFU高保真酶PCR，胶图如下，没有目的条带？
已经有17人回复
- 重组PCR验证时没有目的条带
已经有3人回复
- 反转录后PCR无条带
已经有5人回复
- PCR的电泳结果是除了Marker能出来条带，其他都是什么都没有
已经有9人回复
- 【求助/交流】PCR后没有目的条带，有非特异性条带，求解决办法？？
已经有20人回复
- 【转帖】PCR污染与对策
已经有9人回复
- 【求助/交流】DGGE 胶回收后做PCR没有条带是怎么回事？？急！！！
已经有36人回复
- 【求助/交流】（5.20更新）PCR产物电泳没有条带，why?
已经有20人回复
9楼2011-05-30 20:15:14
2楼2011-05-29 23:19:18
andy99990000
木虫 (初入文坛)
- MolEPI: 7
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1642.4
- 红花: 1
- 帖子: 19
- 在线: 15.8小时
- 虫号: 865235
- 注册: 2009-10-08
- 专业: 疫苗学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金币+5, EPI+1): 很好 2011-05-30 08:28:39
武荷花S(金币+3): 2011-05-30 20:04:08
dhd997(金币+5, EPI+1): 很好 2011-05-30 08:28:39
武荷花S(金币+3): 2011-05-30 20:04:08
|
楼主的图里有阴性对照吗？如果已包括的话，可以排除PCR体系污染的可能，那么很明显你的PCR没有正常工作，可能的原因很多，以个人经验，楼主可以尝试以下几个检测方法： 1. 用实验室一定工作的引物扩增你的DNA,这样能够看出除你的引物以外其他试剂是否工作正常。 2. 确定是引物的问题后还有2种可能： （1）你的PCR条件不适。按你的图来看，完全没工作，可以试试降低退火温度，做touchdown，或者增加Mg离子浓度及循环次数等。 （2）如果以上全试过还是不工作，那么很大程度上就是你的引物设计或者合成的问题了。解决方法就是重新设计或者合成，呵呵，废话了。 个人经验，希望有所帮助~~ |
3楼2011-05-30 00:23:51
4楼2011-05-30 01:42:39
