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轻清1106

铜虫 (小有名气)


[交流] PCR实验前,模板DNA浓度的确定 已有4人参与

用分光光度计测,模板DNA的吸光值,计算其浓度。但做了几次结果都不一样?该如何是好呀?各位虫友支个招吧。。。

几次PCR都只有模糊的条带,效果很差。。
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starseacow

专家顾问 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
问题不在模板上,优化PCR条件吧,摸索一下退火温度
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
2楼2012-08-18 04:54:51
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hongqifei

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2012-08-18 04:54:51
问题不在模板上,优化PCR条件吧,摸索一下退火温度

如果还不行,换一对引物试试看。
何须剑道争锋?千人指,万人封,可问江湖鼎峰,三尺秋水尘不染,天下无双。
3楼2012-08-18 10:27:44
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轻清1106

铜虫 (小有名气)


引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2012-08-18 04:54:51
问题不在模板上,优化PCR条件吧,摸索一下退火温度

嗯嗯,多谢指点!
4楼2012-08-18 15:42:09
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轻清1106

铜虫 (小有名气)


引用回帖:
3楼: Originally posted by hongqifei at 2012-08-18 10:27:44
如果还不行,换一对引物试试看。...

好的。谢谢!
5楼2012-08-18 15:42:24
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czfscf

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
退货温度降两度试试看。不行就只能做个梯度pcr了
Ecological Genomics;the scientific walking hormone
6楼2012-08-18 16:29:14
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kingsummit5021

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我认为是引物的问题,引物与模板配对不好,带有随机性造成的结果。
7楼2012-11-23 20:56:02
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