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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR实验前，模板DNA浓度的确定
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轻清1106

铜虫 (小有名气)

[交流] PCR实验前，模板DNA浓度的确定 已有4人参与

用分光光度计测，模板DNA的吸光值，计算其浓度。但做了几次结果都不一样？该如何是好呀？各位虫友支个招吧。。。

几次PCR都只有模糊的条带，效果很差。。
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1楼 2012-08-18 00:27:25
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
问题不在模板上，优化PCR条件吧，摸索一下退火温度
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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
2楼2012-08-18 04:54:51
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hongqifei

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2012-08-18 04:54:51
问题不在模板上，优化PCR条件吧，摸索一下退火温度

如果还不行，换一对引物试试看。
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何须剑道争锋？千人指，万人封，可问江湖鼎峰，三尺秋水尘不染，天下无双。
3楼2012-08-18 10:27:44
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轻清1106

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2012-08-18 04:54:51
问题不在模板上，优化PCR条件吧，摸索一下退火温度

嗯嗯，多谢指点！
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4楼2012-08-18 15:42:09
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轻清1106

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by hongqifei at 2012-08-18 10:27:44
如果还不行，换一对引物试试看。...

好的。谢谢！
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5楼2012-08-18 15:42:24
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czfscf

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
退货温度降两度试试看。不行就只能做个梯度pcr了
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Ecological Genomics；the scientific walking hormone
6楼2012-08-18 16:29:14
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kingsummit5021

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我认为是引物的问题，引物与模板配对不好，带有随机性造成的结果。
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7楼2012-11-23 20:56:02
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