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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR后电泳无结果
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daringhong

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PCR后电泳无结果 已有4人参与

最近做古菌PCR，PCR后进行电泳检测，除marker有清晰的条带外，样品全部没有条带，并且连引物二聚体也没有。想请问各位大虾，这会是什么原因呢？
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每天进步一点点~~
1楼 2010-10-12 19:46:10
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临风7071

木虫 (正式写手)
★
daringhong(金币+1):谢谢参与
dhd997:编辑内容 2010-10-12 21:19
引用回帖:
Originally posted by daringhong at 2010-10-12 19:46:10:
最近做古菌PCR，PCR后进行电泳检测，除marker有清晰的条带外，样品全部没有条带，并且连引物二聚体也没有。想请问各位大虾，这会是什么原因呢？

请做阳性对照

[ Last edited by dhd997 on 2010-10-12 at 21:19 ]
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2楼2010-10-12 20:26:14
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bettyshan

木虫 (正式写手)

梦幻biobrick
★ ★
daringhong(金币+1):谢谢参与
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-10-12 21:20:17
引用回帖:
Originally posted by daringhong at 2010-10-12 19:46:10:
最近做古菌PCR，PCR后进行电泳检测，除marker有清晰的条带外，样品全部没有条带，并且连引物二聚体也没有。想请问各位大虾，这会是什么原因呢？

PCR的时候做阴阳性对照。阴性对照排除污染，阳性对照判断你的体系有没有问题。如果你的阳性对照都没有条带的话，仔细检查一下是不是忘记加什么东西了？或者是条件不合适等等之类的因素~~
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我们都是芸芸众生的小人物，相遇相知，都是幸福！
3楼2010-10-12 20:44:22
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王会征

铁杆木虫 (著名写手)
★
daringhong(金币+1):谢谢参与
排除PCR本身的原因外，那肯定是引物设计有问题了啊。
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4楼2010-10-12 21:27:57
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犹寒

铁虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):感谢参与` 2010-10-13 08:50:50
我觉得你应该先确定pcr的模板到底有没有，纯不纯，如果模板放了很久，DNA可能会降解
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5楼2010-10-13 08:48:37
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只顾登攀2012

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
有可能引物加少了，或者PCR扩增不成功，建议做阳性对照
赞一下(1人) 回复此楼
只顾攀登莫问高，每天踏实而过，对未来充满希望！！！
6楼2010-10-13 14:28:44
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daringhong

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 临风7071 at 2010-10-12 20:26:14:

请做阳性对照

[ Last edited by dhd997 on 2010-10-12 at 21:19 ]

呵呵，谢谢，已经找到原因了。是PCR体系除出了问题~~
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每天进步一点点~~
7楼2010-10-13 19:48:44
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green1223

木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
估计是缓冲液少了 没通电  哈哈
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2010-11-04 22:22:07
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