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xianglixie3

铜虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 1620
散金: 10
红花: 1
帖子: 135
在线: 32.5小时
虫号: 1980985
注册: 2012-09-06
性别: MM
专业: 植物病理学

[求助] pcr扩增后电泳后条带不对请大侠帮忙!已有3人参与

下面是我的电泳图红框里是我的问题条带基因原长是2900BP左右
PCR模板是连了T载体的质粒
酶切是可以获得目的基因的就是红框后面的酶切条带
但是pCR得不到目的条带
我重新提取了野生型的DNA 也没有扩增出目的条带
我用的酶有primier start 普通TAQ也没有。。。
求解！！！！！！！！！！！！！！1

2015.6.11 sdp37 sdp27 hmg pcr2.jpg

2015.6.11 sdp37 sdp27 hmg pcr2.jpg

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1楼2015-07-10 09:26:16

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

evil丶zero

金虫 (小有名气)

应助: 7 (幼儿园)
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红花: 2
帖子: 170
在线: 75.3小时
虫号: 3302308
注册: 2014-07-01
专业: 微生物遗传育种学

引用回帖:

8楼: Originally posted by ppppppppp at 2015-07-10 23:11:05
楼主啊，问题我看了好久才看懂，下次上图的时候别把整张图都放上来。

据我分析，你质粒模板是加多了，引物还没经过三个循环就差不多用完了。仔细考虑下pcr前三个循环，相信你能懂的。

你好，我刚刚进实验室，好多不懂，想问一下你，PCR前三个循环有哪些要注意的啊，我做PCR时就用genetool拖引物拿师兄给的体系跑，他们没有说这个问题。

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