| 查看: 3812 | 回复: 7 | ||
alman001铜虫 (小有名气)
|
[求助]
菌液PCR条带大小总是和连接片段不一致啊！已有3人参与
|
|
本人利用clontech的genome walker universal kit扩增一个基因的5'启动子序列，扩增出了800bp-3000bp大小不一的各种条带，然后切胶回收，连接到pMD19-T载体，转化大肠杆菌DH5a，之后挑单克隆做菌液PCR（用的是通用引物M13-F/R）。 问题来了： 我的菌液PCR分三种情况：a. 800bp的插入片段，菌液P出来还是800bp左右，这个比较正常 b.1000bp的插入片段，菌液P出来也是800bp左右，不正常 c.2000bp的插入片段，菌液P出来也是800bp左右，不正常 然后我把三种情况的菌液各挑出来3个去测序，发现三种情况之间测出来的结果一致性还比较高，为什么不同大小的片段P出来的条带大小都变小？？但是测序结果却比较相似，两者有什么联系吗？？？ 大家快来帮帮我啊！ |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有120人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
菌液PCR为什么总是没有结果
已经有11人回复- 有关测序问题，为什么送菌液不直接送PCR产物
已经有18人回复
- 蓝白斑筛选挑取白色克隆用菌落PCR验证，除目的片段外还有一条带，什么原因？
已经有10人回复
- 菌液pcr,坐等求助
已经有20人回复
- PCR片段连接载体，转化不出阳性克隆，求解?
已经有14人回复
- 关于PCR连接后菌液鉴定的问题
已经有18人回复
- 菌液PCR出现问题了
已经有23人回复
- RED重组敲除基因，PCR验证时既有目的基因条带也有打靶片段条带
已经有18人回复
- 菌液PCR为什么有杂带而且挺亮的
已经有5人回复
- 菌落PCR有目的条带，重组质粒提取PCR却没条带，请问是什么原因？
已经有13人回复
- 大神救命！！！菌液PCR 出来酶切质粒没有目的条带
已经有5人回复
- 为什么菌液PCR的条带比目的基因小很多。
已经有9人回复
- 菌液pcr总是做不出！求高手解答！
已经有18人回复
- 目的片段和T载体连接后PCR条带诡异
已经有16人回复
- 构建载体后，菌液PCR，没有目的条带！！！
已经有10人回复
- pcr目的条带暗，怎么办呢？？
已经有25人回复
- 挑单克隆后，菌液PCR检测所有条带都偏小，目的条带没有出现
已经有9人回复
- 转化后菌液PCR鉴定，没有目的条带
已经有15人回复
- 载体和酶切片段连接的问题
已经有5人回复
- 菌液PCR出现杂带是什么原因？
已经有17人回复
- 菌液PCR没东西，但是提完质粒能跑出来条带，为什么啊？
已经有16人回复
- PCR时出现了非目的片段的超大片段条带
已经有16人回复
- 菌液PCR是阳性，却提不出来阳性质粒！求助
已经有31人回复
- 请教：菌液pcr带总是很弱，为什么？
已经有3人回复
王希望
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 7199.7
- 散金: 238
- 红花: 2
- 沙发: 1
- 帖子: 652
- 在线: 217.7小时
- 虫号: 315205
- 注册: 2007-02-27
- 性别: GG
- 专业: 作物种质资源与遗传育种学
2楼2015-07-02 15:29:30
3楼2015-07-02 15:42:55
alman001
铜虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 87
- 帖子: 75
- 在线: 54.5小时
- 虫号: 1130961
- 注册: 2010-10-24
- 性别: GG
- 专业: 作物种质资源与遗传育种学
有思路！4楼2015-07-03 09:36:50
王希望
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 7199.7
- 散金: 238
- 红花: 2
- 沙发: 1
- 帖子: 652
- 在线: 217.7小时
- 虫号: 315205
- 注册: 2007-02-27
- 性别: GG
- 专业: 作物种质资源与遗传育种学
5楼2015-07-03 16:15:04
6楼2015-07-09 22:09:25
Anna Chen
新虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 160.8
- 散金: 10
- 帖子: 73
- 在线: 35.2小时
- 虫号: 4337208
- 注册: 2016-01-06
- 性别: MM
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
7楼2016-01-06 13:52:45
Anna Chen
新虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 160.8
- 散金: 10
- 帖子: 73
- 在线: 35.2小时
- 虫号: 4337208
- 注册: 2016-01-06
- 性别: MM
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
8楼2016-01-06 13:54:14