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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 酶切重组质粒
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卢家彬

木虫 (小有名气)

[求助] 酶切重组质粒

M: DL10000 DNA Marker，1：重组pUC19单酶切，2：重组pUC19，3：线性pUC19载体，4：pUC19载体。  该重组子送生工测序正确（用M13通用引物测的，只测两段，是我的目的基因），片段大小在11kbp，但用BamHI单酶切重组子会出现小于2000bp片段，应该是线性pUC19才对，请问这是怎么回事，怎么合理解释这种现象？

酶切重组质粒
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1楼 2015-05-21 19:18:27
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卢家彬

木虫 (小有名气)
卢家彬: 回帖置顶 2015-05-21 19:27:17
补充：基因文库的构建，Sau3AI酶切基因组，BamHI单酶切pUC19载体，然后做得转化
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2楼2015-05-21 19:26:50
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feng890327

新虫 (初入文坛)
你可以确定你的目的基因中间没有BamHI这个位点吗，如果有的话，就有可能出现这种情况，楼主也说了，只测了两头
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3楼2015-05-22 14:09:21
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卢家彬

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by feng890327 at 2015-05-22 14:09:21
你可以确定你的目的基因中间没有BamHI这个位点吗，如果有的话，就有可能出现这种情况，楼主也说了，只测了两头

线性质粒那个位置也应该有一条条带啊，这个特别纠结

[ 发自小木虫客户端 ]
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4楼2015-05-22 17:09:49
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