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卢家彬

木虫 (小有名气)

[求助] 酶切重组质粒

M: DL10000 DNA Marker,1:重组pUC19单酶切,2:重组pUC19,3:线性pUC19载体,4:pUC19载体。  该重组子送生工测序正确(用M13通用引物测的,只测两段,是我的目的基因),片段大小在11kbp,但用BamHI单酶切重组子会出现小于2000bp片段,应该是线性pUC19才对,请问这是怎么回事,怎么合理解释这种现象?

酶切重组质粒
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卢家彬

木虫 (小有名气)

卢家彬: 回帖置顶 2015-05-21 19:27:17
补充:基因文库的构建,Sau3AI酶切基因组,BamHI单酶切pUC19载体,然后做得转化
2楼2015-05-21 19:26:50
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feng890327

新虫 (初入文坛)

你可以确定你的目的基因中间没有BamHI这个位点吗,如果有的话,就有可能出现这种情况,楼主也说了,只测了两头
3楼2015-05-22 14:09:21
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卢家彬

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by feng890327 at 2015-05-22 14:09:21
你可以确定你的目的基因中间没有BamHI这个位点吗,如果有的话,就有可能出现这种情况,楼主也说了,只测了两头

线性质粒那个位置也应该有一条条带啊,这个特别纠结

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2015-05-22 17:09:49
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