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如何加上酶切位点和保护碱基构建目的基因的表达载体?
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zhusiqi1992
新虫
(初入文坛)
应助: 0
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帖子: 5
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虫号: 3334508
注册: 2014-07-22
性别: GG
专业: 植物生理与生化
[
求助
]
如何加上酶切位点和保护碱基构建目的基因的表达载体?
已有1人参与
目的片段已经连T载测序去了。等待测序回来的结果中我需要重新设计引物来扩增加酶切位点,之前连T载时是没有加酶切位点的,
接下来需要把目的片段构建到pGAD-HA载体上,小白一只,不知道怎么加酶切位点和保护碱基。求大神不吝赐教
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小菜鸟啊飞啊飞
1楼
2015-04-28 09:39:08
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晞朔
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虫号: 995408
注册: 2010-04-13
性别: GG
专业: 生物大分子结构与功能
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
选择你目的载体上的多克隆位点,避免外源基因内有该位点。上网站搜索上下游酶切位点,直接在合成引物的时候加上。若你T载体上有你需要的位点,可以直接拿T载体质粒酶切。
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2楼
2015-04-28 10:57:42
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