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kokekole

禁虫 (小有名气)

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wanglele87

金虫 (著名写手)

楼主理解错了,应该是mRNA反转录得到的cDNA和载体连。不是mRNA.你把rna和dna连,那不是搞笑啊

[ 发自小木虫客户端 ]
一生不羁放纵爱自由
2楼2015-04-03 16:52:30
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kokekole

禁虫 (小有名气)

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3楼2015-04-03 17:45:52
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wanglele87

金虫 (著名写手)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-04-03 23:02:11
引用回帖:
3楼: Originally posted by kokekole at 2015-04-03 17:45:52
我的意思是,与载体连接的双链DNA分子的一条链含有mRNA的信息,也就是和mRNA的碱基序列是一样的,当这条链与启动子所在的载体链连接时,翻译会不会出现问题。我的实验过程是这样的,参照genebank中的目的基因(mRN ...

单酶切的话可能插反。双酶切就没事了。除非你都用平末端的酶

[ 发自小木虫客户端 ]
一生不羁放纵爱自由
4楼2015-04-03 18:11:23
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781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼猪不用担心,你的cDNA里面残留的mrna用你设计的引物的条件是p不出来的,PCR扩增的条件是针对DNA的。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
采菊东篱下,悠然见南山。
5楼2015-04-03 20:34:07
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781055707

木虫 (著名写手)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-04-03 23:02:42
这么说吧,PCR里面没有UTP的简基,它是扩增不了的。2.模版的mrna 在反转成cDNA时,用碱法除去了mrba的半条膜版,以单链cDNA在扩增成双链cdba.

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
采菊东篱下,悠然见南山。
6楼2015-04-03 20:54:23
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-字仲康

禁虫 (正式写手)

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7楼2015-04-03 22:59:47
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kokekole

禁虫 (小有名气)

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8楼2015-04-03 23:23:08
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