24小时热门版块排行榜    

查看: 1765  |  回复: 4

aoda123

木虫 (正式写手)

[求助] 基因缺失的载体构建

我需要在目的片段上去掉一小段碱基,然后把剩余部分构建到载体上,该怎么做呢?求经验分享!!!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

身体健康,工作顺利
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
aoda123(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,鼓励应助,分子生物版块期待你的更多精彩。 2013-04-12 08:34:34
ABC B是要去掉的
PCR A&C 中间有一段引物长度的overlap
fusion PCR A+C
2楼2013-04-11 21:24:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuyuetq

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
aoda123(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天 2013-04-12 08:32:48
你这个需要应用重叠PCR的方法,像楼上说的把你的目的片段分成三部分,中间部分为你要去掉的,分别设计4个引物,其中中间的引物需要有一部分的重叠片段,PCR3次即可得到去掉一部分碱基的重叠片段,之后酶切连接到你的质粒上就可以了,你这个是做基因敲出吧,看一下这个文章,你就会更加清楚我所表述的了,这里没法画图给你,希望能帮上忙。
用你的心情过好我的每一天!
3楼2013-04-12 08:08:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aoda123

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by liuyuetq at 2013-04-12 02:08:34
你这个需要应用重叠PCR的方法,像楼上说的把你的目的片段分成三部分,中间部分为你要去掉的,分别设计4个引物,其中中间的引物需要有一部分的重叠片段,PCR3次即可得到去掉一部分碱基的重叠片段,之后酶切连接到你的 ...

谢谢哈!!
身体健康,工作顺利
4楼2013-04-12 08:39:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aoda123

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Haibara_Ai at 2013-04-11 15:24:44
ABC B是要去掉的
PCR A&C 中间有一段引物长度的overlap
fusion PCR A+C

谢谢了,刚开始做,请多指教!!
身体健康,工作顺利
5楼2013-04-12 08:40:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 aoda123 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 326求调剂 +3 上岸的小葡 2026-03-15 4/200 2026-03-15 18:50 by 无际的草原
[考研] 085600材料与化工 求调剂 +11 enenenhui 2026-03-13 12/600 2026-03-14 21:48 by laoshidan
[考研] 301求调剂 +3 归零lbm 2026-03-09 3/150 2026-03-14 02:20 by JourneyLucky
[考研] 2026考研调剂+本科延边大学+山东大学+生物化学与分子生物学+有项目经验 +3 ccdsscjy 2026-03-09 6/300 2026-03-14 02:14 by JourneyLucky
[考研] 085600求调剂 +3 a邵星池 2026-03-09 3/150 2026-03-14 01:32 by JourneyLucky
[考研] 306求调剂 +4 唐薏薏 2026-03-09 4/200 2026-03-14 01:19 by JourneyLucky
[考研] 环境调剂 +6 晓看天暮看云 2026-03-09 6/300 2026-03-14 01:16 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:30 by JourneyLucky
[考研] 311求调剂 +5 牛乳糖的卡卡 2026-03-10 5/250 2026-03-14 00:05 by JourneyLucky
[考研] 341求调剂 +4 番茄头--- 2026-03-10 4/200 2026-03-13 23:12 by JourneyLucky
[考研] 337一志愿华南理工0805材料求调剂 +7 mysdl 2026-03-11 9/450 2026-03-13 22:43 by JourneyLucky
[考研] 求调剂(材料与化工327) +4 爱吃香菜啦 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:11 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西南交大,材料专硕317求调剂 +5 lx8568 2026-03-11 5/250 2026-03-13 21:43 by peike
[考研] 考研调剂 +4 芬达46 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:04 by ruiyingmiao
[考研] 工科278分求调剂 +5 周慢热啊 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:49 by JourneyLucky
[考研] 085600材料与化工 309分请求调剂 +7 dtdxzxx 2026-03-12 8/400 2026-03-13 14:43 by jxchenghu
[论文投稿] 投稿问题 5+4 星光灿烂xt 2026-03-12 6/300 2026-03-13 14:17 by god_tian
[考博] 26读博 +4 Rui135246 2026-03-12 10/500 2026-03-13 07:15 by gaobiao
[考研] 341求调剂 +4 捣蛋猪猪 2026-03-11 4/200 2026-03-12 14:47 by ruiyingmiao
[考研] 收调剂 +7 调剂的考研学生 2026-03-10 7/350 2026-03-10 17:57 by 麦茶汤圆
信息提示
请填处理意见