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aoda123

木虫 (正式写手)

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[求助] 基因缺失的载体构建

我需要在目的片段上去掉一小段碱基，然后把剩余部分构建到载体上，该怎么做呢？求经验分享！！！

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身体健康，工作顺利

1楼2013-04-11 16:53:53

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liuyuetq

木虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★
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aoda123(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天 2013-04-12 08:32:48

你这个需要应用重叠PCR的方法，像楼上说的把你的目的片段分成三部分，中间部分为你要去掉的，分别设计4个引物，其中中间的引物需要有一部分的重叠片段，PCR3次即可得到去掉一部分碱基的重叠片段，之后酶切连接到你的质粒上就可以了，你这个是做基因敲出吧，看一下这个文章，你就会更加清楚我所表述的了，这里没法画图给你，希望能帮上忙。

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用你的心情过好我的每一天！

3楼2013-04-12 08:08:34

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