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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 拟南芥转入过表达载体，基因表达量下降
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lx6218815

新虫 (初入文坛)

[求助] 拟南芥转入过表达载体，基因表达量下降已有1人参与

我将一段基因连到pEarlygate103载体上，构建了一个过表达载体，转到拟南芥中，结果RT-PCR检测这个基因的表达量反而下调了，请问可能是什么原因？
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1楼2012-10-05 21:58:22
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ilyzp

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励应助 2012-10-06 16:55:40
我们实验室倒是碰到过这种情况，最后发现是载体的酶切位点弄反了，相当于是把基因反着转进去的，你最好仔细在检查一下载体图什么的看看
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2楼2012-10-05 22:18:43
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blessed

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
PEG103是35S启动子，过表达后可能在植物体内被沉默了。
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3楼2012-10-07 10:49:06
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irenescbg

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
过表达造成基因沉默是很正常的现象。你可以多找几棵转基因植株，从中找到你所需要的过表达植株。
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请赐予我正能量吧！加油！
4楼2012-10-08 09:30:56
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SUNSER

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

最好重新排查一遍，之前实验室也出现过同样的情况，是构建时候出了问题。
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5楼2014-10-13 16:09:54
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fanwq258

木虫 (正式写手)
请问，你的过表达怎么样了？ 最后 我也是过表达了pEarlygate104载体 但是苗子检测不到荧光信号 提dna能够pcr出目的基因
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要么好好活，要么死，拒绝半死不活
6楼2015-05-31 15:51:11
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