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lx6218815

新虫 (初入文坛)

[求助] 拟南芥转入过表达载体,基因表达量下降 已有1人参与

我将一段基因连到pEarlygate103载体上,构建了一个过表达载体,转到拟南芥中,结果RT-PCR检测这个基因的表达量反而下调了,请问可能是什么原因?
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ilyzp

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励应助 2012-10-06 16:55:40
我们实验室倒是碰到过这种情况,最后发现是载体的酶切位点弄反了,相当于是把基因反着转进去的,你最好仔细在检查一下载体图什么的看看
2楼2012-10-05 22:18:43
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blessed

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
PEG103是35S启动子,过表达后可能在植物体内被沉默了。
3楼2012-10-07 10:49:06
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irenescbg

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
过表达造成基因沉默是很正常的现象。你可以多找几棵转基因植株,从中找到你所需要的过表达植株。
请赐予我正能量吧!加油!
4楼2012-10-08 09:30:56
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SUNSER

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

最好重新排查一遍,之前实验室也出现过同样的情况,是构建时候出了问题。
5楼2014-10-13 16:09:54
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fanwq258

木虫 (正式写手)

请问,你的过表达怎么样了? 最后 我也是过表达了pEarlygate104载体 但是苗子检测不到荧光信号 提dna能够pcr出目的基因
要么好好活,要么死,拒绝半死不活
6楼2015-05-31 15:51:11
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