24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2051  |  回复: 5

记忆流年jk

新虫 (初入文坛)

[求助] 连接T载体转化 已有3人参与

大家好,我PCR产物纯化后,连接T载体,转化后,用抗性筛选后的板子涂菌,培养16小时左右,挑单菌落培养后,做菌液PCR验证后,初步判定为阳性,提质粒,跑电泳验证后准备测序,电泳后发现条带不是我的目的质粒的大小,条带还不止一条,是怎么回事呢,大家能帮我解释下吗?谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Longnil

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-04-03 23:00:52
你提取的质粒可能出现三种构像:超螺旋、线形和开环。电泳时三者的速度大小为:超螺旋>线形>开环所以你会看到不止一条带。
lifeisbeautiful
2楼2015-04-02 20:46:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

记忆流年jk

新虫 (初入文坛)

谢谢,但是我并没有做酶切啊,还有就是这三条带一条都不是我的目的条带,遇到这种情况已经好多次了,郁闷呢

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2015-04-03 00:06:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ngd2013

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-04-03 23:01:26
我提质粒还没遇到过3个条带的情况。你试剂盒提质粒可能没有提好,再提一次,也有可能质粒降解,还有可能片段自连,T载体自连,同时导入细胞内了,,,,
4楼2015-04-03 09:38:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

记忆流年jk

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by ngd2013 at 2015-04-03 09:38:49
我提质粒还没遇到过3个条带的情况。你试剂盒提质粒可能没有提好,再提一次,也有可能质粒降解,还有可能片段自连,T载体自连,同时导入细胞内了,,,,

谢谢
5楼2015-04-03 22:54:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sh_9153

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你提取的质粒可能出现三种构像:超螺旋、线形和开环。超螺旋也有可能不只是一种超螺旋,我曾经提出质粒发现只有5000bp,单酶切之后13Kb ,你可以试试单酶切之后质粒大小
6楼2015-04-09 11:27:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 记忆流年jk 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 352分-085602-一志愿985 +5 海纳百川Ly 2026-03-29 5/250 2026-03-29 09:57 by Sjndkwm
[考研] 279求调剂 +4 蝶舞轻绕 2026-03-29 4/200 2026-03-29 09:45 by laoshidan
[考研] 085600,专业课化工原理,321分求调剂 +5 大馋小子 2026-03-28 5/250 2026-03-29 08:56 by qingfeng258
[考研] 一志愿哈尔滨工业大学材料与化工方向336分 +9 辰沐5211314 2026-03-26 9/450 2026-03-29 01:12 by 我是小康
[考研] 083000学硕274求调剂 +8 Li李鱼 2026-03-26 8/400 2026-03-28 20:33 by 加油向未来啊
[考研] 材料277求调剂 +7 min3 2026-03-24 7/350 2026-03-28 11:39 by xuxiang
[考研] 070300化学求调剂 +4 起个名咋这么难 2026-03-27 4/200 2026-03-27 21:39 by 83503孙老师
[考研] 一志愿南师大0703化学 275求调剂 +4 Ripcord上岸 2026-03-27 4/200 2026-03-27 17:00 by zhyzzh
[考研] 材料292调剂 +12 橘颂思美人 2026-03-23 12/600 2026-03-27 15:44 by caszguilin
[考研] 085600,材料与化工321分调剂 +4 大馋小子 2026-03-27 6/300 2026-03-27 14:11 by 松花缸1201
[考研] 求调剂323材料与化工 +7 1124361 2026-03-24 7/350 2026-03-27 10:22 by wangjy2002
[考研] 276求调剂。有半年电池和半年高分子实习经历 +10 材料学257求调剂 2026-03-23 11/550 2026-03-27 10:13 by YCIT- LHL
[考研] 324求调剂 +8 hanamiko 2026-03-26 10/500 2026-03-27 08:06 by hypershenger
[考研] 351求调剂 +4 麦克阿磊 2026-03-24 4/200 2026-03-27 00:32 by wxiongid
[考研] 325求调剂 +3 Aoyijiang 2026-03-23 3/150 2026-03-26 20:46 by 不吃魚的貓
[考研] 调剂 +4 柚柚yoyo 2026-03-26 4/200 2026-03-26 20:43 by fmesaito
[考研] 材料调剂 5+4 想要一壶桃花水 2026-03-25 10/500 2026-03-26 19:56 by 不吃魚的貓
[考研] 289求调剂 +17 硕星赴 2026-03-23 17/850 2026-03-26 16:18 by 不吃魚的貓
[考研] 调剂 +4 13853210211 2026-03-24 4/200 2026-03-24 19:44 by ms629
[考研] 070300,一志愿北航320求调剂 +3 Jerry0216 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:16 by 。。堂堂
信息提示
请填处理意见