应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 连接T载体的序列可能对大肠杆菌致死，一直转化不出来，有解吗？
81/1返回列表
查看: 2440  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

sunkai0719

铜虫 (初入文坛)

[求助] 连接T载体的序列可能对大肠杆菌致死，一直转化不出来，有解吗？ 已有4人参与

各位同仁大家好，我在扩一段来自病毒的一个基因，该基因pcr能够扩得到，但是连接T载体上之后总是转化不出来。
                            排除t载体连接的原因，因为平行一起转的其他片段都能长的很好。
                            我们实验室同学老师认为是由于该序列可能在大肠杆菌中转录，翻译的蛋白是对大肠杆菌有害的，不知道各位有什么见解，或者是有什么样的解决方案，谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-03-09 15:21:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangrui1988

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
加葡萄糖抑制启动子表达。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2014-03-09 16:31:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

myblin

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
换一种菌株试试吧！有一种菌株DB3.1可以抗一些致死基因如ccdb,你可以试试。或者用一些其他的菌株。
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2014-03-09 19:33:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Lau_Kimura

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
农杆菌Ag10, 生命力顽强。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2014-03-09 23:21:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunkai0719

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by huangrui1988 at 2014-03-09 16:31:03
加葡萄糖抑制启动子表达。

具体应该有怎样的操作呢？谢谢
赞一下 回复此楼
5楼2014-03-10 10:58:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

duowan17

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我以前知道的一个情况，不知道对你有没有帮助。有的基因片段扩增出来之后，在片段的一段会自发的形成一个发卡结构，你要把这个结构打开，才可以连接的上。当然这只是一种可能性，你可以验证下。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2014-03-10 11:14:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangrui1988

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by sunkai0719 at 2014-03-10 10:58:02
具体应该有怎样的操作呢？谢谢...

1%的葡萄糖的LB培养基，其他抗性什么的都一样。
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2014-03-10 13:12:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunkai0719

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by duowan17 at 2014-03-10 11:14:43
我以前知道的一个情况，不知道对你有没有帮助。有的基因片段扩增出来之后，在片段的一段会自发的形成一个发卡结构，你要把这个结构打开，才可以连接的上。当然这只是一种可能性，你可以验证下。

要把这个结构打开，使用什么样的方法呢？
赞一下 回复此楼
8楼2014-03-11 18:29:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 sunkai0719 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 286求调剂 +10 Faune 2026-03-21 10/500 2026-03-21 23:34 by 314126402
[考研] 一志愿211，0703化学310分求调剂 +3 努力奋斗112 2026-03-15 3/150 2026-03-21 22:21 by peike
[考研] 生物学调剂 +3 Surekei 2026-03-21 3/150 2026-03-21 18:31 by 学员8dgXkO
[考研] 材料学硕333求调剂 +3 北道巷 2026-03-18 3/150 2026-03-21 18:17 by 学员8dgXkO
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[考研] 306求0703调剂一志愿华中师范 +5 纸鱼ly 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:11 by 学员8dgXkO
[考研] 279求调剂 +5 红衣隐官 2026-03-21 5/250 2026-03-21 14:59 by lature00
[考研] 330求调剂0854 +3 assdll 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:01 by 搏击518
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +6 77chaselx 2026-03-20 6/300 2026-03-21 07:24 by JourneyLucky
[考研] 083200学硕321分一志愿暨南大学求调剂 +3 innocenceF 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:35 by JourneyLucky
[考研] 324分 085600材料化工求调剂 +4 llllkkkhh 2026-03-18 4/200 2026-03-21 01:24 by JourneyLucky
[考研] 288求调剂 +16 于海海海海 2026-03-19 16/800 2026-03-20 22:28 by JourneyLucky
[考研] 一志愿苏州大学材料求调剂，总分315（英一） +5 sbdksD 2026-03-19 5/250 2026-03-20 22:10 by luoyongfeng
[考研] 材料学求调剂 +4 Stella_Yao 2026-03-20 4/200 2026-03-20 20:28 by ms629
[考研] 招收调剂硕士 +4 lidianxing 2026-03-19 12/600 2026-03-20 12:25 by lidianxing
[考研] 344求调剂 +6 knight344 2026-03-16 7/350 2026-03-18 20:13 by walc
[考研] 【同济软件】软件（085405）考研求调剂 +3 2026eternal 2026-03-18 3/150 2026-03-18 19:09 by 搏击518
[考研] 收复试调剂生 +4 雨后秋荷 2026-03-18 4/200 2026-03-18 14:16 by elevennnne
[硕博家园] 湖北工业大学 生命科学与健康学院-课题组招收2026级食品/生物方向硕士 +3 1喜春8 2026-03-17 5/250 2026-03-17 17:18 by ber川cool子
[考研] 一志愿，福州大学材料专硕339分求调剂 +3 木子momo青争 2026-03-15 3/150 2026-03-17 07:52 by laoshidan
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭