应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 连接T载体的序列可能对大肠杆菌致死，一直转化不出来，有解吗？
汕头大学海洋科学接受调剂
81/1返回列表
查看: 2485  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

sunkai0719

铜虫 (初入文坛)

[求助] 连接T载体的序列可能对大肠杆菌致死，一直转化不出来，有解吗？ 已有4人参与

各位同仁大家好，我在扩一段来自病毒的一个基因，该基因pcr能够扩得到，但是连接T载体上之后总是转化不出来。
                            排除t载体连接的原因，因为平行一起转的其他片段都能长的很好。
                            我们实验室同学老师认为是由于该序列可能在大肠杆菌中转录，翻译的蛋白是对大肠杆菌有害的，不知道各位有什么见解，或者是有什么样的解决方案，谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-03-09 15:21:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangrui1988

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
加葡萄糖抑制启动子表达。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2014-03-09 16:31:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

myblin

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
换一种菌株试试吧！有一种菌株DB3.1可以抗一些致死基因如ccdb,你可以试试。或者用一些其他的菌株。
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2014-03-09 19:33:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Lau_Kimura

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
农杆菌Ag10, 生命力顽强。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2014-03-09 23:21:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunkai0719

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by huangrui1988 at 2014-03-09 16:31:03
加葡萄糖抑制启动子表达。

具体应该有怎样的操作呢？谢谢
赞一下 回复此楼
5楼2014-03-10 10:58:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

duowan17

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我以前知道的一个情况，不知道对你有没有帮助。有的基因片段扩增出来之后，在片段的一段会自发的形成一个发卡结构，你要把这个结构打开，才可以连接的上。当然这只是一种可能性，你可以验证下。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2014-03-10 11:14:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangrui1988

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by sunkai0719 at 2014-03-10 10:58:02
具体应该有怎样的操作呢？谢谢...

1%的葡萄糖的LB培养基，其他抗性什么的都一样。
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2014-03-10 13:12:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunkai0719

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by duowan17 at 2014-03-10 11:14:43
我以前知道的一个情况，不知道对你有没有帮助。有的基因片段扩增出来之后，在片段的一段会自发的形成一个发卡结构，你要把这个结构打开，才可以连接的上。当然这只是一种可能性，你可以验证下。

要把这个结构打开，使用什么样的方法呢？
赞一下 回复此楼
8楼2014-03-11 18:29:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 sunkai0719 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化工学硕294分，求导师收留 +27 yzyzx 2026-04-12 30/1500 2026-04-14 05:42 by 西北望—风沙
[考研] 本科西工大 324求调剂 +5 wysyjs25 2026-04-10 5/250 2026-04-13 23:08 by pies112
[考研] 293求调剂 +16 我爱高数高数爱� 2026-04-12 18/900 2026-04-13 21:47 by 学员JpLReM
[教师之家] 转长聘了 +3 简单化xn 2026-04-13 3/150 2026-04-13 14:18 by wwwkkk83
[考研] 一志愿华工085600 331分 +7 天下ww 2026-04-09 7/350 2026-04-13 09:01 by lhj2009
[考研] 0831生医工第一轮调剂失败求助 +12 小熊睿睿_s 2026-04-11 16/800 2026-04-12 16:28 by 钰璞
[考研] 求调剂 +16 张番茄不炒蛋 2026-04-10 17/850 2026-04-12 13:58 by 熬夜成！
[考研] 331求调剂 +5 王国帅 2026-04-11 5/250 2026-04-11 22:56 by 溪涧流水
[考研] 调剂 +6 青灯不负 2026-04-09 6/300 2026-04-11 20:35 by dongdian1
[考研] 调剂求助 +6 果然有我 2026-04-11 7/350 2026-04-11 16:22 by 明月此时有
[考研] 311求调剂 +13 xyp想读书 2026-04-10 14/700 2026-04-11 09:41 by 猪会飞
[考研] 调剂 化学 307 +21 73372112 2026-04-09 23/1150 2026-04-10 23:53 by wj165256
[考研] 调剂申请086000一志愿西北农林科技大学生物与医药320分-本科齐鲁工业大学 +3 美美女士 2026-04-09 3/150 2026-04-10 10:31 by liuhuiying09
[考研] 367求调剂 +10 hffQAQ 2026-04-09 10/500 2026-04-09 18:06 by lijunpoly
[考研] 求机械专硕297第二批调剂 +5 拾柒12。 2026-04-08 5/250 2026-04-09 16:43 by 允当适度
[考研] 296求调剂 +3 汪！？！ 2026-04-08 3/150 2026-04-08 22:00 by zhouyuwinner
[考研] 生物学学硕，初试351分，求调剂 +4 …～、王…～ 2026-04-08 5/250 2026-04-08 21:49 by limeifeng
[考研] 求考研材料调剂 +3 材化李可 2026-04-07 3/150 2026-04-08 00:21 by JourneyLucky
[考研] 316求调剂 +4 15318418673 2026-04-07 4/200 2026-04-07 22:12 by hemengdong
[考研] 307求调剂 +3 Youth@@ 2026-04-07 3/150 2026-04-07 22:00 by hemengdong
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭