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T载体连接问题
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| 前期克隆基因往T载体上面连接发生了突变,现在换高保真酶后还是往T载体上面连接,可是发生很奇怪的事情。用之前连上T载发生突变的质粒作为对照,现在提出质粒比其小,可是双酶切可以切出我的目的条带,但酶切后的载体比T载体大(T载体大约2600bp左右,可是现今酶切后显示载体有3KB多),pcr验证有很淡的目的条带。不知是怎么回事,之前连接T载体,出过一样的情况,后送去测序,结果全是双峰。不知是不是有杂菌,还是?求高人指教! |
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2楼2012-06-11 09:10:27
3楼2012-06-11 09:54:07
lihao1988903
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