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【求助/交流】pMD-18T载体连接出现了问题，请各位高手指点！！！ 已有15人参与
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各位高手： 大家好！我的目的片段是200bp左右，打算连接到T载体中，当时目的片段用100ul（2个50ul） PCR反应体系回收得到的，用5ul回收产物跑电泳条带非常亮，然后我用TAKARA的pMD-18T载体做连接，载体和目的片段比例分别是1ul：4ul, 0.5ul: 4.5ul， 0.5ul:1.5ul做了三次连接，用天根的DH5a做的转化，氨苄平板上长菌，而且很多，但挑到液体LB中要么长菌，但没有质粒，要么根本就不长菌，摇不起来，我现在不知道到底是哪里出了问题，请各位高手指点一下，本人非常感谢！！！ |
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2楼2010-11-01 11:08:44
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7楼2010-11-01 19:24:24
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