24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1731  |  回复: 15
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

liuwukang

新虫 (小有名气)

[交流] 关于质粒双酶切 已有8人参与

请问各位师兄师姐,
1.酶切时你们是水浴加热还是用PCR仪保温?
2.之前酶切的效果不好,我切了6个小时,现在可不可以延长,比如12小时过夜?会不会使DNA讲解了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuwukang

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by wpwupingwp at 2014-12-08 15:58:13
过夜切过 没啥问题 用的takara的XhoI SphI

我用的也是takara的酶,两种酶的buffer完全不同,坑死,想着也只有延长时间了,之前试过增加酶量效果一般

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
6楼2014-12-08 16:12:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

Neo2000

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你用什么酶,体系怎样?

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-12-08 11:06:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

林家女孩

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我们以前是用37℃水浴酶切,有过夜
3楼2014-12-08 11:11:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guoliwang

至尊木虫 (职业作家)

★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-12-08 16:27:38
一般用金属浴(heating block),比较方便。当然水浴的温度控制会更好。一般的酶最适条件1- 2小时足够,时间过长容易产生非特异酶切。如果两个酶的最适条件不一致造成酶切不成功,可以分两次酶切,第一次酶切产物纯化后再在最适条件进行第二次酶切。
慎思明辨博学笃行
4楼2014-12-08 12:59:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料与化工272求调剂 +4 阿斯蒂芬2004 2026-03-28 4/200 2026-03-28 09:15 by 乐呵呵的追梦人
[考研] 311求调剂 +8 lin0039 2026-03-26 8/400 2026-03-28 08:00 by Iveryant
[考研] 0703化学/290求调剂/本科经历丰富/工科也可 +9 丹青奶盖 2026-03-26 10/500 2026-03-28 07:45 by barnett0632
[考研] 085701环境工程求调剂 +9 多久上课 2026-03-27 9/450 2026-03-28 03:58 by fmesaito
[考研] 285求调剂 +4 AZMK 2026-03-27 7/350 2026-03-27 20:59 by AZMK
[考研] 学硕274求调剂 +5 Li李鱼 2026-03-26 5/250 2026-03-27 20:51 by 热情沙漠
[考研] 一志愿上海理工能源动力(085800)310分求调剂 +3 zhangmingc 2026-03-27 4/200 2026-03-27 19:01 by 给你你注意休息
[考研] 食品工程专硕一志愿中海洋309求调剂 +3 小张zxy张 2026-03-26 5/250 2026-03-27 18:42 by 小张zxy张
[考研] 070300求调剂306分 +3 26要上岸 2026-03-27 3/150 2026-03-27 17:57 by arrow8852
[考研] 安徽大学专硕生物与医药专业(086000)324分,英语已过四六级,六级521,求调剂 +4 美味可乐鸡翅 2026-03-26 4/200 2026-03-27 15:27 by 星空星月
[考研] 一志愿陕师大生物学071000,298分,求调剂 +5 SYA! 2026-03-23 5/250 2026-03-27 09:29 by 不吃魚的貓
[考研] 324求调剂 +8 hanamiko 2026-03-26 10/500 2026-03-27 08:06 by hypershenger
[考研] 304材料求调剂 +4 钟llll 2026-03-26 4/200 2026-03-27 03:42 by wxiongid
[考研] 一志愿哈工大,085400,320,求调剂 +4 gdlf9999 2026-03-24 4/200 2026-03-25 23:01 by boxking200
[考研] 机械学硕总分317求调剂!!!! +4 Acaciad 2026-03-25 4/200 2026-03-25 19:59 by hanserlol
[考研] B区考研调剂 +4 yqdszhdap- 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:51 by baoball
[考研] 食品专硕 一志愿双一流 328 +3 xiaom99 2026-03-21 4/200 2026-03-24 21:20 by lailaisimei
[考研] 080500求调剂 +3 zzzzfan 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:38 by barlinike
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境,总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-23 8/400 2026-03-23 20:36 by Creta
[考研] 336化工调剂 +4 王大坦1 2026-03-23 5/250 2026-03-23 18:32 by allen-yin
信息提示
请填处理意见