| 查看: 1583 | 回复: 5 | ||
[求助]
关于一个载体pGZRS-38的XbaI&SacI双酶切的问题
|
大家好，现遇到这样一个问题：载体pGZRS-38用Fermentas 快速内切酶XbaI&SacI双酶切总是感觉切不开，酶切完后还是有三条带，但中间一条会亮一些，也曾做过分别单酶切，电泳结果类似。也曾对该载体的多克隆位点测序，来自pUC-18，测序结果正确。回收双酶切的中间的亮带，连接后长出的都是些空载菌，而且不知为啥酶切后电泳观察感觉质粒损失很严重，回收的效率非常低。因为XbaI的作用受甲基化影响，所以也购买了全式金去甲基化的E. coli感受态，重新转化质粒，提取质粒，该问题也未得到改善。拜托各位帮我分析一下是什么原因！非常感谢！ pGZRS-38 Xbal&SacI双酶切，Marker为DL5000 |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有264人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 双酶切问题
已经有15人回复
- 求助：关于BamHI SalI 双酶切的问题
已经有16人回复
- PCR ， 双酶切，连接问题
已经有17人回复
- 求助 双酶切验证阳性克隆的问题
已经有12人回复
- 【求助】基因克隆T载体酶切问题等
已经有8人回复
- 双酶切连接表达载体，两个月都没做出来，问题到底出在哪里呢~？求指点
已经有52人回复
- 【求助/交流】质粒双酶切连接问题
已经有7人回复
- 【问题反馈】质粒双酶切切下120bp每次都看不到？
已经有21人回复
- 【分享】关于载体双酶切的一些经验
已经有19人回复
susizheng
木虫 (著名写手)
我們是糖 甜到憂傷
- MolEPI: 10
- 应助: 130 (高中生)
- 贵宾: 0.008
- 金币: 4738.3
- 散金: 2273
- 红花: 56
- 帖子: 2308
- 在线: 740.7小时
- 虫号: 642666
- 注册: 2008-11-01
- 性别: GG
- 专业: 有机合成
2楼2012-03-12 11:14:58
echo110609
木虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1636.1
- 散金: 40
- 帖子: 186
- 在线: 50.7小时
- 虫号: 620340
- 注册: 2008-10-08
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
3楼2013-05-08 17:06:23
4楼2013-05-09 10:22:42
zfj20110603
金虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 889.3
- 红花: 1
- 帖子: 223
- 在线: 223.2小时
- 虫号: 1657873
- 注册: 2012-03-02
- 性别: MM
- 专业: 生物化工与食品化工
5楼2013-07-04 10:37:32
6楼2013-07-05 08:52:14