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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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哈皮Bingo

银虫 (初入文坛)

[求助] 关于PCR连接后菌液鉴定的问题 已有10人参与

PCR连接完成后,质粒转化入感受态细胞培养出单菌落后,进行菌液鉴定并跑胶,出现的条带大小是不是应该是目的片段加两引物大小?
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906394648

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
哈皮Bingo(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-05-14 09:07:05
你可以自己双酶切跑胶看看,但是最好的是送去测序,生工和华大测序我都用过,还行,建议试试
9楼2014-05-13 19:44:20
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猪尾巴草

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
哈皮Bingo(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-05-13 17:59:15
条带大小应该是你PCR目的片段加酶切后质粒之和,引物一般只有20几bp,建议你用提取出来的质粒为模版,用你PCR的上下游引物进行PCR,能P出条带说明连接上了,之后最好送去测序,看有没有位点突变。(你提问很模糊,你是不是就是做的菌液PCR?)
2楼2014-05-13 16:05:11
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亦逐日

金虫 (小有名气)

PCR连接完成?好难啊
道可道,非常道
3楼2014-05-13 16:18:46
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
哈皮Bingo(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-05-13 17:59:33
看你用什么载体了,载体上两引物之间的距离加片段长度即可

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-05-13 17:32:57
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