| 查看: 1386 | 回复: 4 | |||
[求助]
连接转化后鉴定大小不对，求帮助！！！
|
|
我用Age I和 EcoR I酶切回收的PCR产物，得到1500bp的目的片段；用Age I 和EcoR I 酶切载体,得到749bp和9.2kb的片段，回收9.2kb的载体。16℃过夜连接，转化后菌落PCR鉴定，阳性条带应该是534bp，可是出来条带的都在2kb。鉴定引物分别是基因上和载体上的，没有序列上的重复。 别人帮我重新做了一整个流程，结果也一样。抽过质粒，测序结果是空载体。 这方面经验不足，真心求帮助！谢谢。 |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有232人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 为什么最近做连接转化总是失败
已经有20人回复
- 做酶切连接后转化再提质粒，质粒明显变小，Why???
已经有24人回复
- 请教一下连接与转化问题！
已经有11人回复
- 连接转化不成功问题
已经有17人回复
- BAC文库连接转化
已经有22人回复
- 目的基因连接pGEX-6p-1进行转化的问题
已经有14人回复
- 胶回收产物连接转化后菌液PCR电泳条带出现问题
已经有8人回复
- 克隆基因和载体连接后转化至大肠杆菌，为什么每次涂板都是空平板没有菌落？
已经有17人回复
- 【求助/交流】大肠杆菌转化PCR鉴定，没有阳性菌落
已经有5人回复
- 【求助/交流】连接产物转化后菌落PCR正确，提取的质粒却比空质粒还小？
已经有4人回复
- 【求助/交流】大片段连接转化成功与否问题
已经有11人回复
- 【求助/交流】长片段的连接转化
已经有9人回复
peace12039088
银虫 (小有名气)
- MolEPI: 1
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 417.7
- 散金: 300
- 红花: 1
- 帖子: 263
- 在线: 79小时
- 虫号: 613016
- 注册: 2008-09-26
- 专业: 生物大分子结构与功能
2楼2011-08-12 16:19:06
peace12039088
银虫 (小有名气)
- MolEPI: 1
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 417.7
- 散金: 300
- 红花: 1
- 帖子: 263
- 在线: 79小时
- 虫号: 613016
- 注册: 2008-09-26
- 专业: 生物大分子结构与功能
3楼2011-08-12 16:26:41
天使托
专家顾问 (职业作家)
T.Shen
-
专家经验: +57 - MolEPI: 106
- 应助: 95 (初中生)
- 贵宾: 0.263
- 金币: 16299.3
- 散金: 593
- 红花: 74
- 沙发: 9
- 帖子: 3659
- 在线: 290.6小时
- 虫号: 441757
- 注册: 2007-10-27
- 专业: 微生物生理与生物化学
- 管辖: 微生物
4楼2011-08-12 17:28:38
5楼2015-01-20 15:40:32
20