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ming0515铁杆木虫 (正式写手)
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PCR条件,请指导。已有4人参与
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大家好, 最近进行PCR扩增,产物大小理论值为1580bp,用到的PCR条件为下列两种: ①94℃ 5min;94℃ 30s,55℃ 30s,72℃ 1.5min;72℃ 10min; ②94℃ 5min;94℃ 30s,55℃ 1.5min,72℃ 30s;72℃ 10min; 让人纠结的是用①正常的PCR条件尝试各种方法就是P不出条带(也做过梯度PCR45-57℃), 但是因为一个意外PCR条件采用了②条件,扩增出了正确的产物。 对此想请教为什么错误的条件②可以P出正确产物,且以后的验证实验是不是也需要采取②条件。 谢谢! |
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