应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 单个碱基突变的PCR条件如何优化
121/1返回列表
查看: 3048  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

匿名

用户注销 (正式写手)
本帖仅楼主可见

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2013-01-04 10:25:35
已阅   同方向广播   申请MolEPI   回复此楼   编辑   删除   查看我的主页
回帖置顶 ( 共有1个 )

ccharlien

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
amisking: 回帖置顶 2013-01-04 20:01:35
没做过 不过比较难做
多找些ARMS-PCR的文章看看别人怎么优化的吧 祝好运
赞一下 回复此楼
7楼2013-01-04 19:48:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

txw87

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
哦，明白你意思了。你是要用p出来的产物继续研究是吧？
如果你不差钱，去合成含LNA的引物吧，因为你想通过单碱基差异来实现区分扩增，普通引物很难，而含LNA的引物可以做到单碱基差异使Tm值差5度左右，你就可以通过改变Tm值实现区分扩增了
赞一下(2人) 回复此楼
8楼2013-01-04 21:21:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飞天168

银虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主，给你推荐几篇文献吧！是利用3‘端末尾两个碱基错配来设计引物的
A Simple Procedure for the Analysis of Single
Nucleotide Polymorphisms Facilitates Map-Based
Cloning in Arabidopsis
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2013-01-05 08:34:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

txw87

木虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
amisking: 金币+3, 鼓励发帖交流问题。 2013-01-04 20:01:28
同学，请问你要检测的是突变还是SNP？
如果是突变，因为突变的比率较低，利用普通PCR检测是不现实的。
如果是SNP，也不建议使用普通PCR检测，你完全可以利用普通PCR扩增共同的片度，再使用sanger测序来进行分型，sanger测序一个样本也不是很贵，30-50吧。
赞一下 回复此楼
2楼2013-01-04 10:57:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yasmineross

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
除非使用试剂盒，不然用普通的引物很难扩增出单碱基突变，因为普通的引物是混合物。
赞一下 回复此楼
3楼2013-01-04 12:16:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)
本帖仅楼主可见
赞一下
4楼2013-01-04 14:23:50
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

zhang881007

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
简单点，直接测序才20几块钱就可以了。别玩其他花样了，而且不省钱！
赞一下 回复此楼
5楼2013-01-04 15:33:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)
本帖仅楼主可见
赞一下
6楼2013-01-04 16:43:10
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

hupeng

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我现在也做这方面，试过多对引物，结果都不稳定，苦恼中。。。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

大-木-虫
10楼2013-01-17 20:58:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)
送鲜花一朵
本帖仅楼主可见
赞一下
11楼2013-01-18 09:55:49
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

淆之战

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
如果楼主还是比较有钱的话，建议购买PNA，对野生型进行抑制，设计针对突变型特异性的探针进行检测。灵敏度可以达到1/1000。
赞一下 回复此楼
12楼2013-05-26 20:37:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 大-木-虫 的主题更新
121/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 BnSlaJi8z5Vo 2026-08-17 3/150 2026-08-17 17:38 by CBFiACZS7HAK
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +4 angus9576 2026-08-17 8/400 2026-08-17 17:26 by angus9576
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +8 wangze12014 2026-08-14 10/500 2026-08-17 17:05 by xter9665
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 i7NFEVbjQMM5 2026-08-16 5/250 2026-08-17 16:38 by CBFiACZS7HAK
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 EWi2p09MOOv8 2026-08-16 3/150 2026-08-17 16:35 by CBFiACZS7HAK
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 6GojgJvkDudM 2026-08-16 7/350 2026-08-17 16:14 by CBFiACZS7HAK
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +12 Ldrop2023 2026-08-13 15/750 2026-08-17 15:02 by 小豌豆_发芽
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 EWi2p09MOOv8 2026-08-16 6/300 2026-08-17 14:02 by EYK67XJMj64E
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[基金申请] 快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭