应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 单个碱基突变的PCR条件如何优化
121/1返回列表
查看: 2664  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

匿名

用户注销 (正式写手)
本帖仅楼主可见

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2013-01-04 10:25:35
已阅   同方向广播   申请MolEPI   回复此楼   编辑   删除   查看我的主页
回帖置顶 ( 共有1个 )

ccharlien

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
amisking: 回帖置顶 2013-01-04 20:01:35
没做过 不过比较难做
多找些ARMS-PCR的文章看看别人怎么优化的吧 祝好运
赞一下 回复此楼
7楼2013-01-04 19:48:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

txw87

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
哦，明白你意思了。你是要用p出来的产物继续研究是吧？
如果你不差钱，去合成含LNA的引物吧，因为你想通过单碱基差异来实现区分扩增，普通引物很难，而含LNA的引物可以做到单碱基差异使Tm值差5度左右，你就可以通过改变Tm值实现区分扩增了
赞一下(2人) 回复此楼
8楼2013-01-04 21:21:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飞天168

银虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主，给你推荐几篇文献吧！是利用3‘端末尾两个碱基错配来设计引物的
A Simple Procedure for the Analysis of Single
Nucleotide Polymorphisms Facilitates Map-Based
Cloning in Arabidopsis
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2013-01-05 08:34:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

txw87

木虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
amisking: 金币+3, 鼓励发帖交流问题。 2013-01-04 20:01:28
同学，请问你要检测的是突变还是SNP？
如果是突变，因为突变的比率较低，利用普通PCR检测是不现实的。
如果是SNP，也不建议使用普通PCR检测，你完全可以利用普通PCR扩增共同的片度，再使用sanger测序来进行分型，sanger测序一个样本也不是很贵，30-50吧。
赞一下 回复此楼
2楼2013-01-04 10:57:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yasmineross

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
除非使用试剂盒，不然用普通的引物很难扩增出单碱基突变，因为普通的引物是混合物。
赞一下 回复此楼
3楼2013-01-04 12:16:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)
本帖仅楼主可见
赞一下
4楼2013-01-04 14:23:50
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

zhang881007

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
简单点，直接测序才20几块钱就可以了。别玩其他花样了，而且不省钱！
赞一下 回复此楼
5楼2013-01-04 15:33:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)
本帖仅楼主可见
赞一下
6楼2013-01-04 16:43:10
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

hupeng

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我现在也做这方面，试过多对引物，结果都不稳定，苦恼中。。。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

大-木-虫
10楼2013-01-17 20:58:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)
送鲜花一朵
本帖仅楼主可见
赞一下
11楼2013-01-18 09:55:49
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

淆之战

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
如果楼主还是比较有钱的话，建议购买PNA，对野生型进行抑制，设计针对突变型特异性的探针进行检测。灵敏度可以达到1/1000。
赞一下 回复此楼
12楼2013-05-26 20:37:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 大-木-虫 的主题更新
121/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料专硕306英一数二 +8 z1z2z3879 2026-03-16 10/500 2026-03-18 00:01 by 星空星月
[考研] 301求调剂 +6 yy要上岸呀 2026-03-17 6/300 2026-03-17 23:58 by 星空星月
[考研] 考研求调剂 +3 橘颂. 2026-03-17 4/200 2026-03-17 21:43 by 有只狸奴
[考研] 085600材料与化工求调剂 +5 绪幸与子 2026-03-17 5/250 2026-03-17 16:40 by laoshidan
[考研] 有没有道铁/土木的想调剂南林，给自己招师弟中～ +3 TqlXswl 2026-03-16 7/350 2026-03-17 15:23 by TqlXswl
[考研] 梁成伟老师课题组欢迎你的加入 +8 一鸭鸭哟 2026-03-14 10/500 2026-03-17 15:07 by 一鸭鸭哟
[考研] 289求调剂 +6 步川酷紫123 2026-03-11 6/300 2026-03-17 10:23 by Sammy2
[论文投稿] 有没有大佬发小论文能带我个二作 +3 增锐漏人 2026-03-17 4/200 2026-03-17 09:26 by xs74101122
[考研] 环境工程调剂 +6 大可digkids 2026-03-16 6/300 2026-03-16 17:16 by barlinike
[考研] 326求调剂 +4 诺贝尔化学奖觊� 2026-03-15 7/350 2026-03-16 17:11 by 诺贝尔化学奖觊�
[考研] 材料与化工一志愿南昌大学327求调剂推荐 +7 Ncdx123456 2026-03-13 8/400 2026-03-16 12:15 by karry wen
[考博] 东华理工大学化材专业26届硕士博士申请 +6 zlingli 2026-03-13 6/300 2026-03-15 20:00 by ryzcf
[考研] 材料与化工 323 英一+数二+物化，一志愿：哈工大 本人本科双一流 +4 自由的_飞翔 2026-03-13 5/250 2026-03-14 19:39 by hmn_wj
[考研] 一志愿哈工大材料324分求调剂 +5 闫旭东 2026-03-14 5/250 2026-03-14 14:53 by 木瓜膏
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +6 邱gl 2026-03-12 7/350 2026-03-13 23:24 by 邱gl
[考研] 304求调剂 +6 Mochaaaa 2026-03-12 7/350 2026-03-13 22:18 by 星空星月
[考研] 333求调剂 +3 球球古力 2026-03-11 3/150 2026-03-13 21:27 by JourneyLucky
[硕博家园] 085600 260分求调剂 +3 天空还下雨么 2026-03-13 5/250 2026-03-13 18:46 by 天空还下雨么
[论文投稿] 投稿问题 5+4 星光灿烂xt 2026-03-12 6/300 2026-03-13 14:17 by god_tian
[考研] 270求调剂 085600材料与化工专硕 +3 YXCT 2026-03-11 3/150 2026-03-13 10:13 by houyaoxu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭