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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 单个碱基突变的PCR条件如何优化
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匿名

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1楼 2013-01-04 10:25:35
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淆之战

新虫 (初入文坛)
★
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如果楼主还是比较有钱的话，建议购买PNA，对野生型进行抑制，设计针对突变型特异性的探针进行检测。灵敏度可以达到1/1000。
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12楼2013-05-26 20:37:22
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txw87

木虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
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amisking: 金币+3, 鼓励发帖交流问题。 2013-01-04 20:01:28
同学，请问你要检测的是突变还是SNP？
如果是突变，因为突变的比率较低，利用普通PCR检测是不现实的。
如果是SNP，也不建议使用普通PCR检测，你完全可以利用普通PCR扩增共同的片度，再使用sanger测序来进行分型，sanger测序一个样本也不是很贵，30-50吧。
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2楼2013-01-04 10:57:20
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yasmineross

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
除非使用试剂盒，不然用普通的引物很难扩增出单碱基突变，因为普通的引物是混合物。
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3楼2013-01-04 12:16:30
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匿名

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4楼2013-01-04 14:23:50
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