24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1615  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神

[求助] PCR产物胶回收试剂盒 已有1人参与

最近在克隆片段,5K左右,PCR上样20微,条带挺亮的了
回收后,加A,用于下一步和T载体连接,
加A之后跑了下电泳,上样量5微,结果效果就成这么暗了,用的是上海捷瑞的胶回收试剂盒,
搞了11个片段,第三遍了~,前两次都回收不到,试剂盒换的是新的一套,结果还是这么惨,
求各位大神帮分析下,或者提供下自己用的比较好的试剂盒(最小片段2.6K,3个3.5K,剩余基本都是5K左右)


PCR产物胶回收试剂盒
PCR产物.jpg


PCR产物胶回收试剂盒-1
加A后回收.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神

送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-03-17 20:16:29
你回收的时候,胶要多溶一会,过柱子过3-4次,这样可以稍多一些。...

恩,下次应助回帖吧,我好给你金币,准备换个厂家的试剂盒,捷瑞的有点挫~
8楼2014-03-17 23:13:00
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-03-17 10:25:58
dllchina: 金币+2, 有帮助, 谢谢 2014-03-17 19:26:03
的确很低,浓度你再测一下,看看连载体是否达到要求。我们实验室用的试剂盒是天根产的效果还可以。
hehe
2楼2014-03-17 07:53:58
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

最近在克隆片段,5K左右,PCR上样20微,条带挺亮的了
回收后,可以估量。
加A之后不用回收,直接估量就行,然后连接。
加A用Taq酶是72度反应30min,你看看温度你设置的对不对?
3楼2014-03-17 17:01:40
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神

引用回帖:
3楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-03-17 17:01:40
最近在克隆片段,5K左右,PCR上样20微,条带挺亮的了
回收后,可以估量。
加A之后不用回收,直接估量就行,然后连接。
加A用Taq酶是72度反应30min,你看看温度你设置的对不对?

是这个温度,酶还是用的新的
4楼2014-03-17 19:25:20
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 271求调剂 +34 2261744733 2026-04-11 36/1800 2026-04-16 11:22 by gdupt2023
[考研] 0854调剂 +9 950824he@ 2026-04-09 9/450 2026-04-16 11:11 by noqvsozv
[考研] 322求调剂 +8 123安康 2026-04-12 15/750 2026-04-16 11:07 by Espannnnnol
[考研] 材料相关专业344求调剂双非工科学校或课题组 +22 hualkop 2026-04-12 24/1200 2026-04-16 10:54 by Espannnnnol
[考研] 通信工程求调剂!!! +6 zlb770521 2026-04-14 6/300 2026-04-15 20:00 by 学员JpLReM
[考研] 调剂求收留 +34 果然有我 2026-04-10 35/1750 2026-04-15 13:05 by 西北望—风沙
[考研] 各位老师好,求调剂,本科211,一志愿天津大学生物与医药学硕,差两名录取。 +11 路六六jjj 2026-04-13 11/550 2026-04-14 16:01 by zs92450
[考研] 一志愿沪9,326求生物学调剂 +10 刘墨墨 2026-04-13 10/500 2026-04-14 15:16 by zs92450
[考研] 求调剂 +12 何气正 2026-04-13 13/650 2026-04-14 14:47 by zs92450
[考研] 考研调剂 +13 长弓傲 2026-04-13 14/700 2026-04-14 14:44 by zs92450
[考研] 300分求调剂 (085501机械专硕,本科扬大) +9 xu@841019 2026-04-11 10/500 2026-04-14 08:48 by 木木mumu~
[考研] 339求调剂 +4 hanwudada 2026-04-12 4/200 2026-04-13 12:03 by 蓝云思雨
[考研] 生物学调剂 +11 小冉要努力 2026-04-10 13/650 2026-04-13 11:46 by 电化学及催化
[考研] 0854调剂 +10 长弓傲 2026-04-11 11/550 2026-04-13 10:38 by wp06
[考研] 化工调剂求导师收留!一志愿失利,踏实肯干,有植物提取科研经历 +20 yzyzx 2026-04-09 21/1050 2026-04-12 00:12 by 小小小小啦啦啦
[考研] 一志愿厦大0856,306求调剂 +15 Bblinging 2026-04-11 15/750 2026-04-11 22:53 by 314126402
[考研] 343求调剂 +9 王国帅 2026-04-10 9/450 2026-04-11 20:31 by dongdian1
[考研] 农业管理302分求调剂 +3 xuening1 2026-04-10 3/150 2026-04-11 10:18 by zhq0425
[考研] 22408 352分求调剂0854类 +4 努力的夏末 2026-04-09 4/200 2026-04-11 09:57 by zhq0425
[考研] 一志愿沪9,326生物学求相关专业调剂 +4 刘墨墨 2026-04-09 4/200 2026-04-10 12:07 by pengliang8036
信息提示
请填处理意见