| 查看: 2620 | 回复: 27 | |||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | |||
sjjsy7银虫 (小有名气)
|
[求助]
胶回收老收不到，请教高手
|
||
| 本人新手，最近在构载体，刚把基因都P出来，可酶切后老是收不到片段，各种方式都试过了还不行，现想问一下做过的前辈，做胶回收要注意些什么？还有就是哪个公司的试剂盒回收效率高点，我用的是天跟的，不过都放2年多了，马上要中期考核了，很着急，请各位高手帮忙！！！ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜欢
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有268人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有7人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有3人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 胶回收产物连接后片段大小
已经有16人回复
- dna切胶回收中各试剂的作用
已经有14人回复
- 关于DNA胶回收和酶切后回收的问题，诚请指导
已经有9人回复
- omega DAN胶回收试剂盒的溶胶液（binding buffer）没了？
已经有4人回复
- PCR产物凝胶回收、酶切等问题请教
已经有7人回复
- 天跟胶回收试剂盒老是回收不成功
已经有18人回复
- 胶回收产物连接转化后菌液PCR电泳条带出现问题
已经有8人回复
- 【求助/交流】PCR产物切胶回收后可不可以加A尾,做TA克隆，急！希望高手们能帮帮忙！
已经有9人回复
- 【求助/交流】DGGE 胶回收后做PCR没有条带是怎么回事？？急！！！
已经有36人回复
- 【求助/交流】请教关于DNA凝胶回收
已经有16人回复
- 【求助/交流】DNA跑胶2ul有目的带很清晰，但是胶回收时，上样量为20ul时跑电泳却降解�
已经有17人回复
- 【求助/交流】DNA琼脂糖凝胶回收，为什么回收率太低！
已经有53人回复
reallpf
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 6
- 应助: 150 (高中生)
- 金币: 3388.3
- 散金: 2
- 红花: 12
- 帖子: 342
- 在线: 72.6小时
- 虫号: 1892494
- 注册: 2012-07-14
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
1949stone: 回帖置顶 2012-09-17 17:19:48
1949stone: MolEPI+1, very good 2012-09-17 17:20:12
1949stone: MolEPI+1, very good 2012-09-17 17:20:12
|
个人见解，胶回收重要点： 电泳要让目的条带与杂带分开，以防污染；电泳液最好换新的。切胶要完全。 溶胶58度，10分钟，期间混匀3次，保证充分融化。 冰浴约5分钟（此步非常重要，一般试剂盒中都说是冷却至室温，但是温度越低与柱子结合效率越高。不管是质粒提取试剂盒还是胶回收，包括后面的洗脱EB预热是一个道理，温度高柱子结合效率低，温度低结合效率高。所以试剂盒的保存条件是不高于35度，高温保质期短） 冰浴后上柱离心按步骤来。空甩后注意让乙醇挥发完全，直接用鼻子闻下即可，看是否有乙醇味道。 加洗脱液EB，60度放置2-3分钟后高速离心1次即可。 |
20楼2012-09-17 16:27:40
windleakey
金虫 (小有名气)
- 应助: 11 (小学生)
- 金币: 1071.9
- 红花: 1
- 帖子: 94
- 在线: 92.5小时
- 虫号: 1894719
- 注册: 2012-07-16
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
2楼2012-09-01 23:16:58
24楼2012-09-25 15:20:55
mitocam
新虫 (正式写手)
- 应助: 46 (小学生)
- 金币: 1114.5
- 散金: 93
- 红花: 2
- 帖子: 728
- 在线: 152.1小时
- 虫号: 1899939
- 注册: 2012-07-19
- 专业: 细胞呼吸与代谢
3楼2012-09-02 04:09:23
qiaoxianying
银虫 (初入文坛)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 291
- 红花: 2
- 帖子: 11
- 在线: 4.4小时
- 虫号: 1925674
- 注册: 2012-08-05
- 专业: 生物大分子结构与功能
4楼2012-09-02 08:47:54
xiaxuel
金虫 (初入文坛)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 605.5
- 帖子: 7
- 在线: 9.2小时
- 虫号: 1389415
- 注册: 2011-09-04
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
5楼2012-09-02 15:14:25
joan198108
铁杆木虫 (正式写手)
- MolEPI: 2
- 应助: 107 (高中生)
- 金币: 6525.2
- 散金: 12
- 红花: 3
- 帖子: 842
- 在线: 413.5小时
- 虫号: 859607
- 注册: 2009-09-29
- 性别: GG
- 专业: 生物技术药物
6楼2012-09-02 16:19:12
sjjsy7
银虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 313.5
- 帖子: 122
- 在线: 26.1小时
- 虫号: 1617657
- 注册: 2012-02-14
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
7楼2012-09-02 16:36:33
sjjsy7
银虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 313.5
- 帖子: 122
- 在线: 26.1小时
- 虫号: 1617657
- 注册: 2012-02-14
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
8楼2012-09-02 16:38:44
sjjsy7
银虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 313.5
- 帖子: 122
- 在线: 26.1小时
- 虫号: 1617657
- 注册: 2012-02-14
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
9楼2012-09-02 16:40:27
sjjsy7
银虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 313.5
- 帖子: 122
- 在线: 26.1小时
- 虫号: 1617657
- 注册: 2012-02-14
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
10楼2012-09-02 16:42:03
