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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 胶回收老收不到，请教高手
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sjjsy7

银虫 (小有名气)

[求助] 胶回收老收不到，请教高手

本人新手，最近在构载体，刚把基因都P出来，可酶切后老是收不到片段，各种方式都试过了还不行，现想问一下做过的前辈，做胶回收要注意些什么？还有就是哪个公司的试剂盒回收效率高点，我用的是天跟的，不过都放2年多了，马上要中期考核了，很着急，请各位高手帮忙！！！
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1楼 2012-09-01 22:37:26
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mitocam

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
sjjsy7: 金币+1 2012-09-02 16:43:50
1949stone: 金币+1, 鼓励 2012-09-17 17:23:15
限制酶有没有被污染了？跑完胶有没有看到正确的DNA带？回收试剂可以放很久的，应该没有问题。检查一下胶融化后的pH值，回收液应该是黄色的。
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3楼2012-09-02 04:09:23
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windleakey

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
sjjsy7: 金币+1 2012-09-02 16:43:43
1949stone: 金币+1, 鼓励 2012-09-17 17:22:30
我也是新手，最近才做了两次胶回收，用的omega的，也是放在那很久了的，我是用来做转化的所以浓度得高点，我发现最后用无菌三蒸水洗脱时，把洗脱下来的液体再吸回到吸附柱里，再重复洗脱一次，浓度就比以前大不少，希望对你有帮助
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2楼2012-09-01 23:16:58
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qiaoxianying

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看一下溶胶液的PH值，把它调到原来的数值
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4楼2012-09-02 08:47:54
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xiaxuel

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
1949stone: 金币+1, 鼓励 2012-09-02 17:07:49
胶回收应该注意，跑胶的Buffer 为新的，也可能是试剂盒保质期到了，建议换新的试剂盒！我用的是一款国产的试剂盒--karroten 效果很好！回收效率也很高，希望对你有所帮助！
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5楼2012-09-02 15:14:25
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