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龙开聪

金虫 (小有名气)

贵是一种态度

[求助] 天跟胶回收试剂盒老是回收不成功

求助:用的是天根 的胶回收试剂盒,11管PCR产物,差不多500微升的总体积,上四个孔电泳,电泳后用天根的盒子回收到四个EP管,每管40微升,取5微升电泳,居然没有成功,又取10微升电泳还是没有任何条带,不知道可否有人用天根的盒子,是否遇到这方面的问题,一般100微升的PCR产物,回收到多少体积比较恰当,纠结啊,回收了好几次电泳都没有目的条带,盒子是刚买的新盒子,谢谢好心人帮助
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挺住
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gaoyang636

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

龙开聪(金币+1): 呵呵谢谢了 2011-10-20 19:53:45
天根盒子质量很一般……有质量问题影响回收一点也不稀奇
换个牌子吧~
Qiagen的就很好,并且有几次我用的过期一年的Qiagen盒子,效果还杠杠滴
2楼2011-10-20 09:05:12
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zc10052157

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你pCR出来跑胶条带浓吗  溶胶的时候有没有彻底溶解
hold住
3楼2011-10-20 09:10:53
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龙开聪

金虫 (小有名气)

贵是一种态度

引用回帖:
3楼: Originally posted by zc10052157 at 2011-10-20 09:10:53:
你pCR出来跑胶条带浓吗  溶胶的时候有没有彻底溶解

跑出来条带很浓,很亮的,而且胶也融好了,操作也是按说明书要求,成功过一次,那是我把差不多200微升的PCR产物加到一个孔回收,回收得到30微升,回收率太低了吧,哪有这么多酶和dNTP浪费啊,而且回收的再跑电泳取5微升也不是很亮,只看到微弱条带
挺住
4楼2011-10-20 09:44:58
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zc10052157

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

200微升的PCR产物?你跑胶的孔是多大啊
hold住
5楼2011-10-20 09:53:02
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在雨中

金虫 (著名写手)


【答案】应助回帖

龙开聪(金币+2): 同感,天根害人不浅 2011-10-20 19:52:26
去年这个时候我用的天跟的胶回收。很好的PCR产物竟然什么也没有回收回来,辛辛苦苦做的质粒就这么浪费了! 换了其他牌子的回收试剂盒,效果出奇的好!从此后,除了Marker,再也不用天跟。
6楼2011-10-20 10:27:39
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leannele

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

龙开聪(金币+2): 不知道换赛百盛公司的胶回收盒子质量如何 2011-10-20 19:53:05
把问题反应给销售商,要求换盒子。我们也碰到过,开始以为是自己的问题,三个人都试过了,还是不行,后来换一个试剂盒后就没问题了。有的时候一个试剂盒碰到问题是很正常的,毕竟公司的级别就在那。
7楼2011-10-20 11:25:33
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半夏无毒

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

TIANGEN不给力啊~~~上海生工的不错,价格也差不多!
8楼2011-10-20 12:21:00
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fisheart

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

偶们用天根的柱子回收都木有过问题,新盒子里洗脱液里别忘加乙醇
9楼2011-10-20 15:26:39
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ya9570

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

天根的盒子我之前也用过,回收时不能说没有,但是会把浓度降低。我觉得他们柱子本身的吸附能力很差,后来直接把那一大盒拿来做总DNA的纯化使用了。建议用QiaGen的或者是OMEGA的,效果都不错。
有木有人办分子生物学软件培训班?
10楼2011-10-20 15:54:08
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