24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1725  |  回复: 6

micheal_your

新虫 (正式写手)

[交流] 核酸染料GelRed对胶回PCR收产物是否有影响?为何TA克隆少且全是蓝斑 已有5人参与

因实验室限制使用EB,本人采用核酸染料GelRed染色后,切胶回收PCR产物,然后采用Takara pmd 19-T simple vector试剂盒连接,严格按照说明书操作,感受态细胞为JM109(商品化)。蓝白斑筛选结果阴性对照没有菌落,阳性对照(试剂盒自带pUC19)均为白色菌落,但是实验平板上却全是蓝色菌落,不知道是否是由于采用GelRed染料原因,对TA克隆造成影响?求各位大侠赐教!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aixia5

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
GelRed染料对PCR产物和酶切产物都没有影响。
2楼2013-03-18 11:37:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yixinyuan

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
核酸染料倒不会影响PCR产物的回收,发生这种情况,多半是连接反应出问题的,建议排查一下实验过程。
3楼2013-03-18 13:03:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

micheal_your

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by aixia5 at 2013-03-18 11:37:00
GelRed染料对PCR产物和酶切产物都没有影响。

问一下,你们实验室用哪种试剂盒回收GelRed染料染色的核酸片段?
4楼2013-03-21 21:59:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
仿照qiagen的自己配的buffer
zymo的
都没问题
5楼2013-03-21 22:09:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sega97

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
一般通用的染料对回收肯定没有影响的。
[url=http://www.bio123.info]生物123网生物实验方法[/url]
6楼2013-03-21 22:20:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

DoRbIr

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
说实话,感觉最近TaKaRa的产品有问题,我们实验室里最近无论是TaKaRa的内切酶,还是T载,都不好使了。我自己3月初做的,假阳性特别的高,顺便挑了几个白斑去测序,没有目的片段,都是插入了一个碱基。然后用他自带的control连,没连上还不长,载体自连的话,大部分都是白斑。
7楼2013-03-22 02:46:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 micheal_your 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 307分材料专业求调剂 +7 Hll胡 2026-04-05 7/350 2026-04-05 18:47 by 无际的草原
[考研] 一志愿北京交通大学材料工程总分358求调剂 +4 cs0106 2026-04-04 4/200 2026-04-05 18:46 by imissbao
[考研] 277求调剂 +4 考研调剂lxh 2026-04-05 4/200 2026-04-05 18:11 by 蓝云思雨
[考研] 调剂 +4 不逢春 2026-04-05 4/200 2026-04-05 18:07 by ms629
[考研] 材料与化工371求调剂 +10 陪琳看海 2026-04-04 11/550 2026-04-05 15:26 by luoyongfeng
[考研] 318求调剂 +11 ykyhsa 2026-04-05 13/650 2026-04-05 12:44 by aidndnjck
[考研] 301求调剂 +18 骆驼男人 2026-04-02 18/900 2026-04-04 20:33 by 蓝云思雨
[考研] 266求调剂 +8 学员97LZgn 2026-04-03 8/400 2026-04-04 09:02 by 20021109
[考研] 化工求调剂 +11 荔香芝士椰奶 2026-04-03 11/550 2026-04-03 22:06 by 啵啵啵0119
[考研] 334求调剂 +9 Trying] 2026-03-31 9/450 2026-04-03 15:18 by 琢珥丶
[考研] 330求调剂 +3 白神呜呼呼 2026-04-02 3/150 2026-04-03 10:15 by 蓝云思雨
[考研] 085801 总分275 本科新能源 求调剂 +19 bradoner 2026-04-01 23/1150 2026-04-03 10:07 by linyelide
[考研] 一志愿安徽大学0817化学工程与技术,求调剂 +14 我不是只因 2026-04-02 15/750 2026-04-03 09:49 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿陕西师范大学生物学317分 +5 1563日。 2026-04-02 5/250 2026-04-03 06:58 by ilovexiaobin
[考研] 304求调剂 +12 素年祭语 2026-03-31 15/750 2026-04-01 22:41 by peike
[考研] 265求调剂 +11 yelck 2026-04-01 12/600 2026-04-01 19:12 by 549790059
[考研] 350求调剂 +7 阿佳~ 2026-03-31 7/350 2026-04-01 16:12 by yanflower7133
[考研] 求0861交通运输专硕or材料专硕调剂 +4 勒布朗@ 2026-03-31 4/200 2026-04-01 09:54 by 一只好果子?
[考研] 0710生物学求调剂! +6 叙述文 2026-03-31 6/300 2026-04-01 09:39 by JourneyLucky
[考研] 279求调剂 +12 j的立方 2026-03-29 12/600 2026-03-30 20:30 by dick_runner
信息提示
请填处理意见