应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 核酸染料GelRed对胶回PCR收产物是否有影响？为何TA克隆少且全是蓝斑
71/1返回列表
查看: 1993  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

micheal_your

新虫 (正式写手)

[交流] 核酸染料GelRed对胶回PCR收产物是否有影响？为何TA克隆少且全是蓝斑 已有5人参与

因实验室限制使用EB，本人采用核酸染料GelRed染色后，切胶回收PCR产物，然后采用Takara pmd 19-T simple vector试剂盒连接，严格按照说明书操作，感受态细胞为JM109（商品化）。蓝白斑筛选结果阴性对照没有菌落，阳性对照（试剂盒自带pUC19）均为白色菌落，但是实验平板上却全是蓝色菌落，不知道是否是由于采用GelRed染料原因，对TA克隆造成影响？求各位大侠赐教！
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

分子生物学技术交流

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-03-18 08:47:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aixia5

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
GelRed染料对PCR产物和酶切产物都没有影响。
赞一下 回复此楼
2楼2013-03-18 11:37:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yixinyuan

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
核酸染料倒不会影响PCR产物的回收，发生这种情况，多半是连接反应出问题的，建议排查一下实验过程。
赞一下 回复此楼
3楼2013-03-18 13:03:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

micheal_your

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by aixia5 at 2013-03-18 11:37:00
GelRed染料对PCR产物和酶切产物都没有影响。

问一下，你们实验室用哪种试剂盒回收GelRed染料染色的核酸片段？
赞一下 回复此楼
4楼2013-03-21 21:59:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
仿照qiagen的自己配的buffer
zymo的
都没问题
赞一下 回复此楼
5楼2013-03-21 22:09:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sega97

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
一般通用的染料对回收肯定没有影响的。
赞一下 回复此楼
[url=http://www.bio123.info]生物123网生物实验方法[/url]
6楼2013-03-21 22:20:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

DoRbIr

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
说实话，感觉最近TaKaRa的产品有问题，我们实验室里最近无论是TaKaRa的内切酶，还是T载，都不好使了。我自己3月初做的，假阳性特别的高，顺便挑了几个白斑去测序，没有目的片段，都是插入了一个碱基。然后用他自带的control连，没连上还不长，载体自连的话，大部分都是白斑。
赞一下 回复此楼
7楼2013-03-22 02:46:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 micheal_your 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +7 图啦图啦 2026-08-24 8/400 2026-08-24 22:00 by maomao_da
[基金申请] 人气不行了 +10 fansofjerry 2026-08-21 10/500 2026-08-24 21:03 by zhanghaozhu
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》 +6 scalable 2026-08-24 6/300 2026-08-24 20:28 by 苦寒来香
[基金申请] 我面上完蛋了 +9 且听虎啸 2026-08-20 10/500 2026-08-24 20:08 by 苦寒来香
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +14 ziyangfang 2026-08-19 17/850 2026-08-24 18:37 by 哈哈蛤？
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 21/1050 2026-08-24 14:21 by refreshing11
[基金申请] 估计是周四 +4 archvillain 2026-08-18 4/200 2026-08-24 13:53 by zzuzxg
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +6 炎黄贵胄 2026-08-22 7/350 2026-08-24 11:58 by 6543yes
[基金申请] 朋友圈看到的 +7 wangzilk 2026-08-18 9/450 2026-08-24 10:50 by cmrandy
[基金申请] 放榜前的不淡定 20+4 snowwithsea 2026-08-19 17/850 2026-08-24 10:20 by echo8914667
[基金申请] 明天应该可查了！？ +4 chengyan1220 2026-08-23 4/200 2026-08-24 08:47 by gloomy6159
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 看来今天不会放榜了？ +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭