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micheal_your

新虫 (正式写手)

[交流] 核酸染料GelRed对胶回PCR收产物是否有影响?为何TA克隆少且全是蓝斑 已有5人参与

因实验室限制使用EB,本人采用核酸染料GelRed染色后,切胶回收PCR产物,然后采用Takara pmd 19-T simple vector试剂盒连接,严格按照说明书操作,感受态细胞为JM109(商品化)。蓝白斑筛选结果阴性对照没有菌落,阳性对照(试剂盒自带pUC19)均为白色菌落,但是实验平板上却全是蓝色菌落,不知道是否是由于采用GelRed染料原因,对TA克隆造成影响?求各位大侠赐教!
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DoRbIr

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
说实话,感觉最近TaKaRa的产品有问题,我们实验室里最近无论是TaKaRa的内切酶,还是T载,都不好使了。我自己3月初做的,假阳性特别的高,顺便挑了几个白斑去测序,没有目的片段,都是插入了一个碱基。然后用他自带的control连,没连上还不长,载体自连的话,大部分都是白斑。
7楼2013-03-22 02:46:29
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