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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】PCR产物直接纯化，不用胶回收和试剂盒，请问有这种方法吗？
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kaludefeiyu

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】PCR产物直接纯化，不用胶回收和试剂盒，请问有这种方法吗？

PCR产物直接纯化，不用胶回收和试剂盒，请问有这种方法吗？
可以用DNA重沉法吗？各位兄弟姐妹帮帮忙啊
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1楼 2011-03-25 09:00:42
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yabxxh

木虫 (正式写手)
kaludefeiyu(金币+1): 2011-03-25 09:55:34
我不知道你是不想跑胶还是怎么地，反正电泳是为了出去小片段，并纯化目的片段，你不想跑胶的话，可以用PCR清洁试剂盒，很快
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2楼2011-03-25 09:46:54
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iaminxanadu

木虫 (正式写手)
kaludefeiyu(金币+1): 2011-03-25 09:55:39
需要试剂：酚氯仿、NaAc 、乙醇

具体步骤网络上很多的，好久不做，记不清了
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3楼2011-03-25 09:54:54
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kaludefeiyu

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by kaludefeiyu at 2011-03-25 09:00:42:
PCR产物直接纯化，不用胶回收和试剂盒，请问有这种方法吗？
可以用DNA重沉法吗？各位兄弟姐妹帮帮忙啊

做TA克隆的话，pcr产物用试剂盒纯化好还是pcr产物跑电泳后把目的片段切胶回收了做好啊？我要做的是真菌的18srDNA鉴定
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4楼2011-03-25 09:59:04
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
kaludefeiyu(金币+1): 2011-03-25 13:59:52
引用回帖:
Originally posted by kaludefeiyu at 2011-03-25 09:59:04:
做TA克隆的话，pcr产物用试剂盒纯化好还是pcr产物跑电泳后把目的片段切胶回收了做好啊？我要做的是真菌的18srDNA鉴定

条带单一的话用PCR柱纯化无妨，如果不单一的话就老老实实切胶回收。
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5楼2011-03-25 10:10:17
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hitliutao

银虫 (小有名气)
kaludefeiyu(金币+1): 2011-03-25 14:00:36
我试过乙醇沉淀的方法，由于PCR产物量还是太少了，失败了。所以还是老老实实用KIT吧
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6楼2011-03-25 10:13:30
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susizheng

木虫 (著名写手)
kaludefeiyu(金币+1): 呵呵 2011-04-02 16:13:47
不切胶，不过柱，引物二聚体怎么除掉呢？不会这么懒吧。
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7楼2011-03-25 15:49:59
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