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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】请问大家关于dna回收的问题
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jia1012428

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】请问大家关于dna回收的问题 已有10人参与

请问大家，片段回收和胶回收各能收回多大以上的片段，他们的区别除了胶回收能收回特定的目的dna外，还有什么，请大家发表意见，多谢！
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1楼 2010-10-10 22:01:59
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graper

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
楼主说的还不太明白。。   片段回收是指？   我现在只见识过胶回收  帮顶
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2楼2010-10-10 22:10:37
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long5lizi

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
好像用专门的试剂盒就可回收，它说明上有标明回收大小
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3楼2010-10-10 22:14:16
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虫子火箭兵

金虫 (正式写手)
★
scelab(金币+1):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-10-11 23:56:38
不同的试剂盒回收片段的大小和回收效率都是不同的，具体情况还得阅读产品的说明书
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4楼2010-10-11 20:05:36
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jia1012428

铜虫 (小有名气)
我说的当然是用专门的试剂盒，现在谁还手工提质粒啊。我是想让熟练操作的同学给点经验，什么时候用胶回收，什么时候用片段回收，这个问题是很细的，你们说的都太笼统了。
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5楼2010-10-11 22:21:21
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王会征

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★
scelab(金币+3):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-10-11 23:56:46
本人做胶回收比较多，提供以下个人经验：胶回收所能回收片段的大小一个最关键的因素是胶回收所用的柱子，如果片段很大或很小的话都要配置适宜的柱子，这个商家有卖，你可以根据需要联系购买一些。本人建议大片段可用无水乙醇沉淀法进行纯化。
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6楼2010-10-11 22:25:10
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jia1012428

铜虫 (小有名气)
多谢楼上
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7楼2010-10-12 19:31:34
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1110rainjob

铜虫 (小有名气)

回收问题

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):感谢参与~ 2010-10-12 20:16:25
1、我记得100bp以上的片段都可以回收，但是需要增加一些处理，具体多大的片段需要什么处理，相关的试剂盒都有说明，可以参考一下。
2、除了你说的胶回收可以特异回收目的片段外，他们的回收率也是有一定差别的，一般胶回收回收率大约50%，片段回收的回收率约80%。
个人见解，仅供参考，希望对你有帮助，祝试验顺利！
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8楼2010-10-12 19:58:58
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ben1147

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+10):正解啊~~~‘对手工提质粒抱有成见，我对此表示遗憾’ me too :D 2010-10-12 23:28:22
胶回收和其他各种纯化试剂盒没什么区别

关键就是柱子质量的好坏，影响截留率和截留范围

填料的多少影响回收量，填料多了回收量大（适合于质粒提取，DNA/RNA提取，以及大量酶切产物回收），但是对于微量样品，洗脱率低。填料少了相反，适合于一般的PCR产物回收/纯化，以及其他除酶操作，核酸容易洗脱，但是柱子容易过载，上样量不能太大

至于那些溶液，6M NaI，70%乙醇，TE，谁还不会配了？

另外，楼主貌似对手工提质粒抱有成见，我对此表示遗憾
过柱方便是方便，回收率是他的硬伤。手提质粒在任何一个实验室都是需要的
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9楼2010-10-12 22:44:58
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jia1012428

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 1110rainjob at 2010-10-12 19:58:58:
1、我记得100bp以上的片段都可以回收，但是需要增加一些处理，具体多大的片段需要什么处理，相关的试剂盒都有说明，可以参考一下。
2、除了你说的胶回收可以特异回收目的片段外，他们的回收率也是有一定差别的， ...

我不是这个意思呀，我是在用试剂盒操作过程中，发现了这个问题，没手提过呀。你回答的很专业，我学习了！
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10楼2010-10-17 10:05:23
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