【求助/交流】请问大家关于dna回收的问题 - 分子生物 - 综合其他

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jia1012428

铜虫 (小有名气)

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引用回帖:

Originally posted by ben1147 at 2010-10-12 22:44:58:
胶回收和其他各种纯化试剂盒没什么区别

关键就是柱子质量的好坏，影响截留率和截留范围

填料的多少影响回收量，填料多了回收量大（适合于质粒提取，DNA/RNA提取，以及大量酶切产物回收），但是对于微量样品 ...

我不是这个意思呀，我是在用试剂盒操作过程中，发现了这个问题，没手提过呀。你回答的很专业，我学习了！

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11楼2010-10-17 10:05:56

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fjt198719

木虫 (著名写手)

永远的菜鸟

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dhd997(金币+2):谢谢交流。 2010-10-17 20:03:15

PCR产物没有非特异带就可直接回收，不用切胶，另外PCR产物酶切也不用切胶回收，直接回收就可。胶回收主要是针对质粒酶切，或者条带多，专一回收目的条带采用。回收率的话自己看说明书就行。你搞量大点还怕回收率！
本人一贯喜欢手提质粒，对试剂盒汗颜啊，手提的量又大有不错，我曾经遇到过试剂盒抽提放置了一段时间降解的情况。

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独YY不如众YY！！！

12楼2010-10-17 10:19:36

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taigongzaici

新虫 (小有名气)

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dhd997(金币+2):谢谢交流。 2010-10-17 20:04:03

引用回帖:

Originally posted by jia1012428 at 2010-10-10 22:01:59:
请问大家，片段回收和胶回收各能收回多大以上的片段，他们的区别除了胶回收能收回特定的目的dna外，还有什么，请大家发表意见，多谢！

我不知道楼主是不是这个意思。
胶回收就是跑胶，然后切胶，然后溶胶回收。

片段回收就是跑完PCR直接把PCR产物纯化回收，不用跑胶。

其实，这要根据你的实验目的，因为切胶过程，很多实验室都是紫外，这一过程，很有可能，碱基突变，人为切得不干净，损失太大，有害健康还耽误时间等等。

所以，有些人直接把PCR产物直接纯化回收，可以避免这些缺点。但是请注意，这样对PCR产物要求较高，尽量避免非特异性带还有引物二聚体，因为这些也一并被收下来了。

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13楼2010-10-17 19:06:17

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