| 查看: 2015 | 回复: 6 | |||
[求助]
[求助]蓝白斑筛选不长菌已有1人参与
|
|
之前做过很多次都没出现过这个问题，这次也是按照原来的方法做的，竟然不长菌。载体是天根的pGM-T，感受态是JM109，目的片段500bp左右，也是用天根的胶回收做的。失败后，考虑了连接和感受态细胞的问题。 1.连接的验证 模板：载体试剂盒中的control insert DNA(700bp) 引物：SP6、T7 结果：  2.感受态细胞 本来以为是我的JM109是不是传代出现问题了，用新的JM109做的。 A.连接载体转入CP cell，37度振荡培养1h后，有晕状浑浊出现，涂于LB+（表面涂有IPTG16μl，X-gal 40μl)平板培养基，37度培养15小时，不长菌。 B.单独的CP cell分别涂了LB+和LB-两个平板培养基，两个都长菌了，涂LB-的长的比LB+的多。 真的是特别的郁闷，请大家多多指教！先说声谢谢！！ |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有149人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
蓝白斑筛选都是 假阳性
已经有7人回复- 关于TA克隆蓝白斑筛选
已经有12人回复
- 蓝白斑筛选白色菌落PCR无条带
已经有12人回复
- 蓝白斑筛选问题
已经有10人回复
- 蓝白斑筛选没有菌落，或者都是白斑，是什么情况
已经有9人回复
- 蓝白斑筛选实验中对照组平板长出很多菌落 但是实验组平板上一个菌落没有
已经有3人回复
- 第一次做蓝白斑筛选，培养12h后无斑
已经有9人回复
- 蓝白斑筛选的时候不长单菌落
已经有48人回复
- 蓝白斑筛选什么都没长，不是感受态的问题。真诚求助高手解答！
已经有15人回复
- 蓝白斑筛选：培养好的平板为何要在4℃才能使蓝色更明显？
已经有8人回复
- 蓝白斑筛选 菌落成串
已经有15人回复
- 蓝白斑筛选只长白斑
已经有10人回复
- 蓝白斑筛选时IPTG，Xgal，Amp的用量
已经有14人回复
- 蓝白斑筛选问题
已经有6人回复
- 蓝白斑筛选出现的问题
已经有11人回复
- 【求助/交流】蓝白斑筛选问题
已经有3人回复
- 【求助/交流】蓝白斑假阳性的困惑
已经有3人回复
- 【求助/交流】蓝白斑筛选实验原理
已经有7人回复
- 【求助/交流】请教蓝白斑筛选时，为什么蓝白斑不明显？
已经有7人回复
- 【求助/交流】蓝白斑筛选
已经有9人回复
- 【求助/交流】大家做TA克隆、蓝白斑筛选用什么样的感受态细胞？
已经有20人回复
- 【求助/交流】蓝白斑筛选
已经有8人回复
- 【求助/交流】蓝白斑筛选
已经有6人回复
- 【求助/交流】蓝白斑筛选什么也不长
已经有16人回复
2楼2013-10-29 09:55:21
3楼2013-10-29 09:57:44
4楼2013-11-02 09:49:19
5楼2013-11-04 16:11:26
6楼2013-12-11 20:22:53
7楼2013-12-11 22:49:32